围绝经期综合征肾阴虚证大鼠汗液分泌及其生化指标的变化
目的 评估围绝经期综合征肾阴虚证“病证结合”模型大鼠的汗液分泌情况,并探讨其生化指标的 变化。
方法 将 18 只 SD 雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组,每组 6 只。 假手术组行假手术,模型组 和阳性药组大鼠行双侧去卵巢手术,术后第 7 天给予 L⁃甲状腺素(92 mg / kg),每天 1 次,连续给药 7 d 建立围绝经 期综合征肾阴虚证“病证结合”模型。 阳性药组每日灌胃清骨散汤剂(7. 3 g / kg),假手术组和模型组灌胃等量蒸馏 水,每天 1 次,共 14 d。 采用和田⁃高垣试剂着色法测定大鼠足跖部汗液分泌。 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大 鼠血清 cAMP、cGMP、LH、GnRH、E2 水平。 蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定大鼠足趾肉垫组织的激动 M3 胆碱 能受体(M3R)、激动 β2 得上腺素能受体(β2AR)、水通道蛋白 5(aquaporin,AQP5 )表达水平。
结果 (1)与假手术 组相比,模型组出现体温升高、双耳发红、易激惹、毛发干枯等阴虚证的典型行为学表现,且大鼠汗液分泌显著增 多。 (2)模型组血清 cAMP 水平显著升高,cGMP 水平显著降低,cAMP / cGMP 比值显著升高,LH、GnRH 水平显著 升高,E2 水平显著降低。 (3)大鼠足趾组织的 M3R 表达下调,β2AR、AQP5 表达水平上调。 与模型组相比,阳性药 组体温降低、毛发脱落减少等阴虚证典型行为学表现缓解;血清 cAMP 水平显著下降,cAMP / cGMP 比值显著降低, LH、GnRH 水平降低,但不影响血清 E2 水平。 大鼠足趾组织的 M3R 上调,β2AR、AQP5 表达水平下调。
结论 去势 联合 L⁃甲状腺素建立的围绝经期综合征肾阴虚证“病证结合”模型大鼠汗液分泌显著增多,其机制可能与 cGMP、 cAMP 及其在汗腺上调控汗液分泌的关键蛋白 M3R、β2AR、AQP5 的变化有关。
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