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用cas9技术进行基因编辑的时候需要做什么呢？

通过设计位点特异性的guide RNA来最大程度的降低脱靶问题。有一些免费的软件可以帮助你设计和评估目标靶点。比如：  http://www.e-crisp.org/E-CRISP/index.html     http://crispr.mit.edu/
合成并且纯化出具有DNA核酸内切酶活性的cas9 mRNA和特异性guide RNAs
如果你计划做一个敲入模型需要纯化出donor DNA
选择合适基因的背景小鼠进行超排获得可用的单细胞胚胎随后进行体外受精（不是所有的小鼠都合适做超排）
将mRNAs（donor DNA）显微注射进入胚胎
将胚胎培养到囊胚阶段（3.5天）
制作假孕鼠
将培养好的囊胚转移到假孕鼠体中
小鼠出生后，founder鼠需要做基因鉴定确保cas9基因编辑成功
繁育阳性的founder鼠确保基因突变是可遗传的