小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
2015年01月27日
来源:生物秀
作者:生物秀
责任编辑:cxyinfo2014
摘要:细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合,将异物消化分解。吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助,如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞,则可阻断吞噬泡的形成;免疫抑制剂环磷酰胺(CYP)对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。
目的要求
1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理
2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程
基本原理
细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合,将异物消化分解。吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助,如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞,则可阻断吞噬泡的形成;免疫抑制剂环磷酰胺(CYP)对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。
实验用品
1.器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等
2.试剂:
0.85%生理盐水;阿氏(Alsever)血液保存液;可溶性淀粉6.0g加水100ml煮沸备用。
3.材料:小白鼠;1%鸡红细胞悬液
方法与步骤
鸡翼下静脉取血后,加生理盐水离心两次,然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水,调至鸡红细胞浓度为1%。
实验前三天,每天向小鼠腹腔注射1ml可溶性淀粉,实验前30分钟,向腹腔内注射1ml1%的鸡红细胞。
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