7. 豚鼠的血液采集

(1)少量血的采集  豚鼠的背阳静脉有外侧面静脉和内侧距静脉,均适合少量采血。

1)操作时由助手固定豚鼠,并将动物的后肢膝关节伸直到操作者面前。

2)对动物脚面用酒精消毒,并找出外侧距静脉和内侧阳静脉后,以左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器刺入静脉后可见刺入部位立即出血呈现半球隆起,采血完毕后立即用纱布或脱脂棉压迫止血。

反复取血时,两后肢应交替使用。

(2)中量血的采集   一般采用心脏采血,豚鼠的心脏采血一般不需要开胸。一次采血量达25～3Oml。

1)准备好离心管,编号,装入试管架,根据实验要求，如需要抗凝剂可选用1%肝素钠溶液0.1ml均匀地浸湿试管管壁,放入80 ℃右左的烘箱中烤干备用。

2)将豚鼠仰卧固定在鼠固定板上,用剪刀剪去左侧胸部心脏部位的被毛,并用腆酊和酒棉球常规消毒皮肤。

3)用左手触摸心脏搏动处,一般选择在胸骨左缘第4～6肋间心脏跳动最明显处穿刺。

4)右手持连有6～7# 针头的注射器,垂直刺人心脏,当针头正确刺入心脏时,血液随心脏跳动而进入注射器内,将注射器回抽采血。取血时应迅速,以缩短针留在心脏内的时间,防止血液在注射器内凝固。万不得已时也可切开胸部之后,将注射器针头直接刺入心脏抽取血液。

5)采到所需要的血量后拨出针头,干棉球按压针眼后将动物放回笼中,经过 6～7d后,可进行重复心脏采血。

6)注意:一定要挤压一侧胸肋,以减少心脏跳动的空间,否则实验动物容易死亡。

(3)大量血的采集

1)豚鼠的断头采血:准备好洁净、干燥的试管,编号,装入试管架中,如需要抗凝剂,可选1%肝素钠溶液或0.2%乙二胶四乙酸二钠,按相应的SOP进行操作。

操作者用左手握住豚鼠头、颈背部,露出颈部,右手用大(中)号粗剪刀将颈部剪断。立即将鼠颈向下,对准已准备好的试管,将血液滴入容器内。

2)豚鼠的眶静脉和眶动脉采血:操作时,左手抓住鼠颈部皮肤,并将豚鼠轻轻压在实验台,取稍侧部位,左手拇指尽量将动物眼周围的皮肤往眼后压,使豚鼠的眼球突出充血,用弯头眼科镊迅速夹去眼球,并将豚鼠倒立,头向下,眼眶内很快流出血液。让血液流入容器,直到流完。

此法采血量多于断头法,但该方法容易导致动物死亡。其他操作程序同大小鼠。

3)豚鼠的颈总动脉(静脉)采血:操作时,麻醉豚鼠,仰卧位固定,以颈正中线为中心广泛剃毛、消毒。剪开皮肤,将颈部肌肉用无钩镊子推向两侧，暴露气管,可见平行于气管的白色迷走神经和桃红色的颈动脉,颈静脉位于外侧,呈深褐色。分离后,结扎远心端,并在近心端放置缝线,在缝线处用动脉夹阻断动脉,在结扎线和近心端缝线之间使用眼科剪作"T"或"V"形切口,并将尖端呈斜形的塑料导管经切口处向心脏方向插入lcm,结扎近心端缝线,将血管与塑料管固定好,另一端放入采血容器中,打开动脉夹即可采血。

8. 家兔的血液采集

(1)少量血的采集 采用耳缘静脉采血,一次采血量可达 5～1Od。

操作时将家兔固定在固定盒内或由助手固定,选择静脉较粗、清晰的耳朵,拔去采血部位的被毛,消毒处理。用双手轻弹双耳或使用二甲苯擦血管局部。用 6# 针头沿耳缘静脉远心端刺入血管。采血完毕使用脱脂棉压迫止血。

(2)中量血的采集主要采用家兔耳正中、易辨认的中央动脉采血,该法一次采血量可达10～15ml。

1)准备洁净、干燥的离心管/试管,编号,装入试管架,根据实验要求如需抗凝,可选用1%肝素钠溶液0.1.ml0.2% 乙二胶四乙酸二钠0.1ml均匀地浸湿试管管壁,放入80℃左右的烘箱中烤干、备用。

2)操作时,将家兔置于兔固定盒内。

3)用于拔去耳中部被毛,并揉擦使兔耳充血,然后用75%酒精棉球消毒,必要时可用二甲苯棉球擦兔耳,使其充血。

4)以左手固定兔耳,右手取连有7# 针头的注射器,在兔耳中部可见一条颜色较鲜红的血管即为中央动脉。在动脉远心段沿着动脉平行方向刺人动脉,因抽注射器进行采血。

5)采到所需要的血量后,立即拔出针头,注意用干棉球压迫采血点止血。

(3)大量血的采集

l)家兔的心脏采血:准备洁净、干燥的离心管/试管,编号,置试管架如需要抗凝,耐用1%肝素钠溶液0.1ml或0.2%乙二胶四乙酸二钠0.1时,均匀地浸湿离心管管壁,放人80 ℃左右烘箱中烤干、备用。

 将家兔仰卧固定,用剪刀剪去心前区部位(一般在左侧第 3～4 肋间 , 胸骨左缘3m左右处)的被毛,并分别用碘酒和75%酒精棉球消毒皮肤。

用左手触摸心脏搏动,选择心脏跳动最明显处作穿刺。

右手持连有6～7# 针头的注射器,垂直刺入心脏,当针头正确刺人心腔时,血液随心脏跳动而进入注射器内,将注射器回抽,进行采血,取血时应迅速,以缩短针头留在心脏内的时间，防止血液在注射器内凝固(也可切开胸部将注射器针头直接刺人心脏抽取血液 ) 。

采到所需要的血量后,立即拔出针头,这样心肌上的穿孔较易闭合。该法一次可采取家兔全血量的1/6～1/5, 经过 6～7d 后 , 可以重复进行心脏采血。 

2)家兔的颈总动脉(静脉)采血:操作同豚鼠的颈总动脉(静脉)采血,1次采血量可80～l00ml。

3)兔股动脉或颈动脉采血:准备好洁净离心管/试管、编号,置试管架中.如需要抗凝,选用1%肝素钠溶液0.1ml,均匀地浸湿试管管壁,放入80 ℃左右的烘箱中烤干后,备用。

采用戊巴比妥钠(3Omg/kg)iv 或 ip 麻醉动物后,将家兔仰卧固定于兔手术台上,剪去腹股沟部位或颈部的被毛。

先作股动脉或颈动脉分离手术。血管分离后,在动脉下穿一根手术线,备用。 

提起血管下手术线,用手指垫于血管下面,取连有 7# 针头的干燥注射器,与血管平行向心方向将针头刺入血管,稍向前行一点,动脉血即进入注射器内。

采到所需要的血量后,立即拔出针头,用干棉球压迫出血口止血或用动脉夹夹住止血2～3min。

如果系动物处死前取血,则可用止血钳分别夹住动脉的离、向心两端,用手术剪剪断血管,精心管口对准向心端,松开止血钳,血液涌入管内,至所需血量为止。