实验方法
动物实验常用技术标准操作规程（七）&动物给药（1）
2015年02月26日
来源：实验动物管理与实用技术手册
作者：徐国景 唐利军 易工城 孔利佳
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摘要：动物的给药方法主要分为投入法和注射法两种,根据给药途径又分为很多具体的类型投入法可分为经鼻腔投入、经胃腔内投入、经肠管内投入、经气管内投入和经口腔投入等;四法分为皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜内注射、脑内注射、·胸腔内注射、静脉注射、关节内注射和心内注射等。
在动物实验过程中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化,常常需要将药物给予于实验动物体内。给药的途径和方法是多种多样的 , 应根据不同的实验目的、动物种类 药物剂型来决定动物的给药途径与方法。
动物的给药方法主要分为投入法和注射法两种,根据给药途径又分为很多具体的类型投入法可分为经鼻腔投入、经胃腔内投入、经肠管内投入、经气管内投入和经口腔投入等;四法分为皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜内注射、脑内注射、·胸腔内注射、静脉注射、关节内注射和心内注射等。
根据实验需要,我们可以采用不同的实验动物给药途径,但要使实验药物准确进入实验动物,我们要注意不同途径的给药容量(见表4-5-5、表4-5-6）。
以下将各种动物的主要给药途径和方法一一介绍。
( 一 ) 经口腔投入给药
1. 液体药物的投入
(1) 小鼠、大鼠、沙鼠 通常使用不锈钢、头端球形的灌胃针操作。
l) 根据实验要求配制受试药液,按相应操作规程将动物称重,计算出给药容积。
2) 大鼠采用2～5ml注射器、小鼠用1ml注射器,分别装上大鼠、小鼠灌胃针头,抽取受试药,置实验台上待用。
3) 用右手抓住鼠尾将鼠提起,放在鼠笼上或粗糙面上。将鼠尾轻轻向后拉,待鼠向前爬行时,用左手拇指和食指抓住鼠的两耳和头部皮肤,其他三指抓住背部皮肤,将鼠抓持在手掌内。
4) 使鼠腹部朝上,颈部拉直,头部向后略倾斜,测量灌胃针头到胃内的位置(成年小鼠从口腔应开始的深度大约 3cm,大鼠、沙鼠从口腔开始的深度大约5cm)。
5) 右手取已抽好受试药的注射器,把灌胃针的前端放进动物口腔,顺着上腭部插入咽部;醒目针头的前端通过咽喉部后有抵触感,轻轻转动灌胃针头的前端,沿着动物的纵轴平行插入;进入食道后没有抵抗感,然后把灌胃针头插入到动物胃部所需要到达的位置。
6) 右手拇指推动注射器,将药液徐徐推入胃内,注射完毕后轻轻取出灌胃针头。
其技术要点是:动物要固定好;头部颈部保持平展;进针方向正确;一定要沿着口角进针,并沿咽后壁顺着食管方向插入胃内;决不可进针后,在动物剧烈挣扎时强行灌胃。
(2) 豚鼠所使用的灌胃针及操作技术要点向上。
1) 根据实验要求配好受试药的浓度,将动物称重,计算出给药体积。
2) 用2～5ml注射器抽取受试药,装上大鼠灌胃针头。
3) 抓稳豚鼠躯体,左手拇指和食指抓住豚鼠头部两侧,其他三指抓住身体的下半部，使豚鼠固定在手中。
4) 使腹部朝上,颈部拉直,头部向上有一个倾斜度,测量灌胃针头到胃内的位置(豚鼠的口腔开始的深度大约 5cm)。
5) 右手持已抽好受试药的注射器,针头沿鼠左侧嘴角通过食道进入胃内。
6) 右手拇指推动注射器,将药液推入胃内。
(3) 家兔通常使用软的8#橡皮导尿管插管灌胃。
插管最常见的并发症是食管损伤和把受试物误投入气管,故最好能在动物做吞咽动作将胃管经咽部送入食道。用压舌板或木制开口器可防止动物在导人胃管时咀嚼,有时也采鼻饲。操作时,事先将待插的导尿管泡在水或生理盐水中,这样容易插入且不容易损伤食道。
1) 根据实验要求配好药液,按相应的标准操作规程抓取家兔并称重,计算出给药体积；另准备150ml烧杯一个, 内装清水约l00ml 备用。
2) 操作者取坐式将家兔的腹部以下躯体夹于两大腿之间,左手握住家兔双耳,右手抓双前肢。
3) 另一人的拇指和中指在家兔的两颊部从下顿处紧紧挤压,从两口角按向口腔内;用手将木制开口器从一侧口角插入口腔,使家兔咬住开口器,家兔舌在开口器下方稍出来一些，使开口器接近口角,由外向内翻转开口器使之压住舌面,将开口器的布条绕过头颅并捆在耳根部,固定开口器。
4) 操作者取导尿管一根,将其管前端以清水浸湿,经开口器中部小孔将其缓缓向食道插入,自家兔口腔开始深度大约为15～20cm左右( 随家兔大小可适当调整)。
5) 将导尿管的外端浸入烧杯的水中,等候片刻,若有气泡自管中冒出,则表明在气管应拔出再插;若无气泡自管中冒出,表明插入胃中,可进行给药操作。
6) 取准备好药物的注射器,将注射器接在导尿管上将药液缓缓推入,此时家兔应较安可能还可见吞咽动作。
7) 药物推注完毕 , 再用注射器吸取少量 (3～5ml) 空气或生理盐水推人 , 使导尿管中有药液残留。
8) 随后捏闭导尿管外口,较快抽出导尿管后取出开口器,将家兔归笼并观察。
(4) 犬通常使用软的12#十二指肠管或橡皮导尿管,亦可用内径0.3cm的软胶灌胃。
操作时,准备150ml烧杯一杯,内装清水约 l00ml,事先将待插的导尿管泡在水或生水中,这样容易插入且不容易损伤食道。
1) 按相应的标准操作规程抓取犬,或将其固定于采血台上,或助手取坐位,将犬背朝自己,一只手固定头颈,另一只手固定双前肢,并以双大腿夹住犬的下腹部以下部位(遇凶狠的犬应先用纱布将犬嘴绑住)。
4) 用右手拇指和食指将灌胃管插入此空隙,并顺食管方向不断送入。
5) 如送入很顺利 , 当胃管插入深度大约20cm时,不要再向里插,因已进入食管下段胃内,先将胃管外端口插入盛水的烧杯中,若无气泡自管中冒出,则认为导尿管己插入胃内,即可将 粮经胃管缓慢灌入。
6) 药液注完后,抽出注射器,吸进约3~5ml空气或生理盐水,再将其注入胃管内,注毕迅速抽出胃管。
7) 如遇胃管送入不顺或犬剧烈挣扎时,不要再向里插,可拉出重插。
也可以使用开口器(木制长方形,长10～15cm,厚2～3cm) 固定,操作时将其放入动物的上下门齿之间,用绳将其固定于犬嘴。将带有弹性的橡皮导管,经开口器的小圆孔插入,沿咽 蹭插入食道,其他操作同上。
(5) 猴通常使用软的橡皮管或导尿管。
操作时,准备150ml 烧杯一个,内装清水约l00ml,事先将待插的橡皮管泡在水或生理盐水中,这样容易插入且不容易损伤食道。
按猴的抓取与SOP规定控制住猴,先将猴嘴掰开,把外径5～7mm的橡皮管插入食道,自动物口腔开始深度大约为15cm。
经鼻腔给药时,托起猴子下颁使其嘴紧闭,从鼻孔处将外径1.5mm的塑料管(涂上石蜡油)慢慢插入食道内,特别注意不要插入气管。
2. 固体药物的投入
使用固定药物投入途径通常适用于体型较大的动物,大小鼠类通常不采用。
(1) 豚鼠把豚鼠放在实验台上,用左手从背部向头部握紧并固定动物,以拇指和食指压迫左右口角使其口张开。实验者把药物放在舌根处,使豚鼠迅速闭口而自动吞下。
(2) 犬片剂、丸剂、胶囊给药时常徒手经口给药。
给药时,掰开动物的上下领部,用慑子将固体药物送入犬的舌根部,合起上下领,犬可以咽下药物。投药前以水湿润口腔内部,使之容易咽下。
(3) 猴一般在非麻醉情况下给予片剂或胶囊,给药方法类似于犬。此时,需要特别注意,防止猴伤人。
操作时,事先由助手将猴子固定好,实验者把左手掌贴在猴的头顶部到脑后部的部位,用持指及食指压迫猴的左右面颊,使其上下腾的咬合处松开,然后用右手拿长镶把固体药物送入猴的舌根部。迅速抽出镊子,把猴的上下腾向上一推,使其闭上嘴,让猴自己咽下即可。
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