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实验方法

精液的稀释与保存(四)

2015年03月06日 浏览量: 评论(0) 来源:《实验动物管理与实用技术手册》 作者:徐国景 易工城 唐利军 孔利佳 责任编辑:lmjinfo

( 四 ) 精液的保存

精液保存 (semen preservation) 的目的是为了延长精子的存活时间及维持其受精能力,但由于长途运输,扩大精液的使用范围,增加受配雌性动物头数,提高优秀雄性动物的配种麟,精液保存分为液态保存和冷冻保存。精液的冷冻保存将在本章第六节中加以介绍。精液的精态保存又可分为常温保存和低温保存。

1. 常温保存

常温保存的温度一般是15~25 ℃。由于保存温度不十分恒定,允许其有一定的变化幅度,春秋季可放置室内,夏季也可置于地窖或用空调控制的房间内,故又称室温保存或变温保存。一般将稀释的精液分装后密封,用纱布或毛巾包好,置于 15~20 ℃环境下避光存放即可。

其保存原理是:精子在弱酸性环境中,其活动受到抑制,降低了能量消耗,pH 值一旦恢复到中性,则精子即可复苏。因此,在精液稀释液中加入弱酸性物质,调整精子的酸性环境,从而控制精子的活动,达到保存精子的目的;精子在一定的pH 值范围内,处于可逆性抑制。不同酸类物质对精子产生的抑制区域和保护效果不同,一般认为有机酸较无机酸好;但常温保存精液也利于微生物的生长繁殖,因此必须加入抗菌素。此外,加入必要的营养物质(如单糖)及隔绝空气等,均有利于精液的保存。 用此方法保存不需要特殊设备,简单易行,便于普及和推广,适应于各种动物精液的短期保存。其有效的保存时间(具有正常的受精能力)为1~2d 。

2. 低温保存

多数动物精液低温保存的温度是0~5℃。一般将稀释好的精液置于冰箱或广口保温瓶中,在保存期间要保持温度恒定,不可过高过低。操作时注意严格遵守逐步降温的操作规程,原则上精液稀释后,要逐渐降温到 O~5℃,避免精子先生冷休克。所以一般要用平均每30min

降低5℃的速度降温,即每分钟下降0.2 ℃左右的速率。但在实践中,为了提高工作效率,都采用直接降温法。即将分装有稀释精液的试管 ( 或小瓶 ),包以数层纱布或棉花,再装入塑料袋内,而后直接放入冰箱 (O~5℃ )或装有冰块的广保温瓶中,也可将其放入30 ℃冰箱(室温) 杯中,再一起直接放入O~5℃的环境中,经1~2h,精液温度降至O~5℃。

低温保存的精液在输精前一定要进行升温处理,一般可将存放精液的试管或小瓶直接浸入30 ℃温水中即可。

低温保存原理:当温度缓慢降至0~5℃时,则精子呈现休眠状态,精子代谢机能和活动力减弱。因此利用低温来抑制精子活动,降低代谢和运动的能量消耗。当温度回升后,精子又逐渐恢复正常的代谢机能而不丧失其受精能力。为避免精子发生冷休克,在稀释中需添加一定卵黄、奶类等抗冷物质,并采取缓慢降温的方法。

低温保存的有效时间为3~5d,各种动物不同、释液的种类不同,有效时间也有差异。

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