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显微受精技术
2015年03月23日
来源:《实验动物管理与实用技术手册》
作者:徐国景 易工城 唐利军 孔利佳
责任编辑:lmjinfo
摘要:显微授精 (microinsemination,MI)又称为显微受精(micmfertilization,MF),是 20 世纪 80 年 代以后发展起来的一种新型体外受精技术。
显微授精 (microinsemination,MI)又称为显微受精(micmfertilization,MF),是 20 世纪 80 年 代以后发展起来的一种新型体外受精技术。它是借助显微操作仪,将精子或精子细胞 , 直接注入卵母细胞质内(卵胞质内受精 ,intracytoplasmic sperm injection,ICSI)或卵周隙中( 带下受精,subzonal insemination,SUZI),实现受精过程。这项技术可以排除透明带或质膜对精子人卵的阻碍作用,对精子的死活及其完整性无严格要求。因此对动物受精机理研究、男性不育的治疗、野生动物的保护及转基因动物的制备等方面具有特殊意义和应用前景。1976 年 Uehara和Yanagimachi将仓鼠精子注入卵母细胞中,观察到精核能够解聚并可以发育形成雄原核。1988 年,Mann将运动的精子注入小鼠卵周隙中首次得到成活的后代。1993 年,Hosoi 等将不运动的精子注入兔卵胞质内也得到了正常的后代。1995 年,Kimmura和 Yanagimachi 对显微操作仪进行改进,用 Piezo-driven 操作系统使小鼠的显微受精成功率有了很大提高,80% 的注射卵可以成活,其中 70% 在体外发育到囊胚,移植产仔率达30%。目前,显微受精技术已经在无精或少精的男性不育临床治疗,以及转基因动物的制备等方面得到了应用。
显微受精的基本程序包括卵子的收集和处理、精子或精核的制备、精子或精核的显微注射以及卵子的激活等步骤。以小鼠和兔的为例,说明哺乳动物显微受精的过程。