实验方法
小鼠的胚胎移植(二)
2015年03月13日
来源:《实验动物管理与实用技术手册》
作者:徐国景 易工城 唐利军 孔利佳
责任编辑:admin
摘要:小鼠的胚胎移植
( 四 ) 胚胎移植
1. 输卵管移植
(1) 将假孕母鼠,用戊巴比妥钠按 l00mg/kg 量尾静脉麻醉;
(2) 采用头左尾右的方式放置,在背侧肾部剪毛,酒精消毒后,在背中线最后肋骨与脊柱旁1cm 处,即背直肌外缘大约肾脏的部位剪开一纵切口,打开腹腔;
(3) 拉开皮肤开口到两侧,可见白色脂肪体,输卵管、卵巢通常附着于肾脏,在肾脏表附着白色组织块为卵巢周围脂肪垫,卵巢呈菜花状,红色,输卵管顺势寻找。用钝镊子夹住脂肪垫将卵巢、输卵管和子宫角部分拉出;
(4) 小心将动物移到体视显微镜下,避开血管(有时以防出血,可先滴些肾上腺素),拨开卵巢表面的组织膜并找到输卵管并稍加固定勿动。同时在镜下找到输卵管伞部,把移卵管快速从伞口处插入,将胚胎吹入输卵管,直到从输卵管中看到气泡为止,略停片刻拔出。
(5) 将卵巢、输卵管、子宫复位。另一侧输卵管用同样方法移植,最后涂上少量青霉素和链霉素,缝合创口,用腆酊消毒。做好标记,放置笼中于白炽灯下,待其苏醒。
2. 子宫角移植
麻醉假孕母鼠,与输卵管移植操作相同,在取出卵巢、输卵管、子宫后,准备好胚胎,同时在显微镜下于子宫与输卵管连接处用 4# 或 5# 针头避开大血管扎一个孔,注意针孔位置,拔出针,把载有胚胎的移卵管沿针孔插入,轻轻将胚胎吹入子宫。再将卵巢、输卵管、子宫放回腹腔。另一侧子宫用同样方法移入胚胎,一般每侧移入 6~8 枚胚胎。最后缝合创口,涂上青霉素和链霉素。
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