广东省实验动物信息网

( 三 ) 胚胎的采集

1. 采集时间

以供体猪拒配计0d,用手术法从输卵管采卵(1～2d)或子宫角采卵 (3-8d)。供体猪手术前应停食 12～24h,可以供给适量饮水。

2. 供体猪的麻醉和保定

供体猪上颚牵拉,限制活动,按 20-3Omg/kg静脉缓慢注射2.5%戊巴比妥钠麻醉,然后仰放在手术保定架上,四肢固定。根据需要肌肉注射适量的盐酸氯胶酮。

3. 手术部位及其消毒

手术部位一般选择在在倒数第2、3 个乳头之间,先用电剪或毛剪在术部剪毛,应剪净毛茬,用清水清洗净术部,然后涂以2%～4%的碘酒,待干后再用 70%～75% 的酒精棉脱碘,盖创巾于手术部,使预定的切口暴露在创巾开口的中部。

4. 手术方法

沿腹中线,尽量避开血管,切开皮肤5～8cm左右口,沿着切口左右钝性分离脂肪和肌肉层,使腹膜露出后,用钝头剪刀剪开腹膜,露出子宫。依组织层次分层切开,便于暴露猪的子宫和卵巢。

切开腹膜应避免损伤腹内脏器,先用镊子提起腹膜,在提起部位作一切口,然后用另一只手的食指深入腹膜引导刀(向外切口)或用外科剪把腹膜剪开。

术者将食指及中指由切口伸入腹腔,在与骨盆腔交界的前后位置触摸子宫或子宫角,摸到后用二指夹持,牵引至创口的表面,循一侧子宫角(或子宫)导出输卵管或另一侧输卵管及子宫,在输卵管末端转弯处找到该侧卵巢。不可用力牵拉卵巢,不能直接用手捏卵巢,更不能触摸排卵点和充血的卵泡。观察卵巢表面排卵点和卵泡发育,详细记录。