4. 微分干涉和极性显微镜去核法

对于一些脂肪颗粒含量较少的卵母细胞(如兔和小鼠等),在微分干涉相差显微镜下观察到染色体,因此对于这类卵母细胞可直接在微分干涉相差显微镜下去核(kono et al,1991)。然而,对于脂肪颗粒含量较多的卵母细胞(如猪),在微分干涉相差显微镜下则看不到染色体。

最近,美国在极性光学显微镜的基础上研制出一种纺锤体图像观察系统 (spindle view),在这种显微镜下,可直接观察到卵母细胞的纺锤体 , 从而可准确地对卵母细胞去核。目前,这种去核方法已越来越多地被许多实验室采用。

5. 离心去核法

离心去核的原理是根据细胞核与细胞质的密度不同,细胞核的密度大于细胞质,用离心方法可使没有透明带自的卵母细胞核被甩向一侧而最后脱离卵母细胞。Yang等(1989)利用离心法成功地去除了没有透明带的仓鼠卵母细胞核。然而,由于该方法必需去掉透明带,不利于随后的胚胎发育,如果同样能应用于透明带完整的卵母细胞,那么这种方法会成为一种有效的去核方法。

6. 化学试剂去核法

用 Etoposkle 和放射菌酮处理处于第一次减数分裂中期的小鼠卵母细胞,处理后的染色体相互紧密结合,不易分开，形成染色体复合体,在卵母细胞排出极体时,染色体复合体随极件起排出,这样可使卵母细胞去核成功率达90%。

以上几种去核方法的前4 种比较常用。