( 五 ) 重构胚的激活

核移胚的正常发育有赖于卵母细胞的充分激活,低的核移胚发育率可能与卵母细胞未充激活有关。在核移植操作中,常用电脉冲诱导供体细胞与受体卵母细胞间的融合与激活。这种电激活方法不能引起重组胚产生像受精时精子所诱导的所有反应。Wakayama 等（1998)采用电融合后再用化学试剂(乙醇、钙离子载体等)激活处理的方法,可明显提高核移植胚胎的发育率。

通过近年来的大量研究,下列 4 种方法均能有效地激活各个成熟阶段的卵母细胞 : ①钙离子载体结合电激、放线菌酮和细胞松弛素处理。②乙醇结合放线菌酮和细胞松弛素处理。③ 离子霉素或钙离子载体结合二甲氨基瞟岭(6·DMAP)处理。④电激活结合三磷酸肌醇与 6-

DMAP 处理。

( 六 ) 重构胚的培养

经融合和激活后的重构胚,其培养方法主要有体内和体外培养两种。体内培养就是在细胞核质融合后,以琼脂包埋,移入暂时的中间受体(如兔)的输卵管内,培养 4～5d 后,然后回收胚胎进行移植。这种方法操作较为复杂,成本高,不利于商业性核移植。因此,人们现在一般采用体外培养方法。