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小鼠采血方法
2015年08月31日
来源:原创
作者:李晓菲
责任编辑:admin
摘要:小鼠采血方法包括腹主动脉采血、眼眶静脉丛取血、摘眼采血、剪尾采血方法、心脏采血方法、断头采血方法、 颈动静脉、股动静脉采血方法。
1.1 腹主动脉采血
将小鼠麻醉后用组织剪剖开腹部,分离出腹主动脉。一手持一次性注射器,将针头近乎平行(小于30°)刺入腹主动脉,另一手固定针头,一手缓慢抽动注射器,抽取所需量血液。取完血后,用棉球轻压针眼处,快速拔出针头。
1.2 眼眶静脉丛取血
采血时用一手抓住鼠尾并提起,放在表面较粗糙的台面或笼具盖上,用另一手食指和拇指抓住小鼠尾巴移交给无名指和小指夹住,再用拇指和食指捏住双耳及头颈部皮肤固定,提起小鼠。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。一手持硬质毛细玻璃管,将毛细玻璃管与鼠眼球成约45°从眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180°使斜面对着眼眶后界。刺入深度约2~3mm,当感到阻力时即停止推进,同时将针向后略退,若穿刺适当,血液即自动顺着玻璃管流入离心管中。得到所需的血量后即可拔出玻璃管。
优点:眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。血流较快,采血量多,能在较短时间内采到3~5mL血。伤口较小,愈合较快。成功率高,死亡率低。缺点:不能避免组织液的混入,对于血样要求较高的研究应谨慎使用。另外,多次使用易引起小鼠的感染。对后续试验结果存在一定影响。
1.3摘眼采血
一般来说,可以三人配合取血。取血前不需麻醉,用眼科剪剪掉小鼠的胡须。一人抓小鼠并用眼科弯镊摘眼球,一人用止血钳夹住小鼠的嘴部以固定小鼠头部,另一个人拿试管接血。成功关键在于固定好鼠头部。
1.4剪尾采血方法
所需血量很少时采用本法。用一手抓住小鼠的尾根部提起置于实验台上,让其自然进入固定器内,使尾巴外露,用手先将尾巴尖部摩擦若干次(天冷时,应将室温提高到15~20℃),使尾部血管充盈。用一锋利刀片在尾尖部切开一段尾静脉,稍停片刻,尾静脉血即可流出,用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏,可以取到一定量的血。取血后,先用棉球压迫止血,并立即用6%火棉涂于伤口处,使伤口外结一层薄膜。也可采用交替切割尾静脉方法取血。用一锋利刀片在尾尖部破一段尾静脉,静脉血即可流出,每次可取0.3~0.5mL,供一般血常规实验。两根尾静脉可替换切割,由尾尖向根部切割。或将小鼠麻醉,按上述方法尾尖取血。
1.5心脏采血方法
动物仰卧固定于鼠板上,用剪刀将心前区的毛剪去,用酒精消毒此处皮肤,左侧第3~4肋间,用一手示指摸到心搏,另一手持连有4~5号针头的注射器,选择心搏最强处刺穿,当针头正确刺到心脏时,鼠血液由于心脏跳动的力量,血自然进入注射器,即可取血。鼠类心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
优点:抽血快,血液不易凝集,心区面积大, 进针准确性较高, 易一针见血, 且采血量能满足大量试验需要 缺点:心脏损伤较大,难以迅速愈合,不利于短期连续采血。
1.6断头采血方法
实验者带上棉手套,用左手抓紧鼠颈部位,右手持剪刀,从鼠颈部剪掉鼠头迅速将鼠颈端向下,对准备有抗凝剂的试管,收集从颈部流出的血液,小鼠可取血0.8~1.2mL。
1.7颈动静脉、股动静脉采血方法
麻醉动物背位固定,一侧颈部或腹股沟部去毛,切开皮肤,分离出静脉或动脉,注射针沿动静脉走向刺入血管。20g小鼠可抽血约0.6mL。也可把颈静脉或颈动脉用镊子挑起剪断,用试管取血或注射乳嘴抽血,股静脉连续多次取血时,穿刺部位应尽量靠近股静脉远心端。
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