省级发布专栏
实验动物饲养环境沉降菌检验试剂配制标准操作规程
1. 目的
规范实验动物饲养环境沉降菌检验试剂配制,确保检验结果准确、可靠。
2. 内容
2.1大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)
培养基采用大豆酪蛋白琼脂培养基,可以按以下处方制备,也可使用按该处方生产的符合要求的脱水培养基。
按配制1000mL大豆酪蛋白琼脂培养基计,
酪蛋白胰酶消化物 15.0g
大豆木瓜粉蛋白酶消化物 5.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 15.0g
蒸馏水/纯化水 1000mL
也可使用市购成品大豆酪蛋白琼脂培养基:
大豆酪蛋白琼脂培养基 40g
蒸馏水/纯化水 1000mL
取上述成分除琼脂外混合,微热溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.2,加入琼脂,加热融化后,121℃高压灭菌20min,冷却至60℃左右,在无菌操作要求下倾注约15~25mL至无菌平皿中(Φ90mm2)。加盖后在室温放至凝固。或按市购成品培养基说明配制,121℃高压灭菌15min。
2.2 营养琼脂培养基
采用市购成品营养琼脂培养基,配制如下:
营养琼脂培养基 32g
蒸馏水/纯化水 1000mL
将上述成分混匀后,调节pH值为7.2±0.2,121℃高压灭菌15min,冷却至60℃左右,在无菌操作要求下倾注约15~25mL至无菌平皿中(Φ90mm2)。
2.2 培养基平皿培养及保存
制备好的培养基平皿倒置放入恒温箱内,经24h无菌培养,无细菌生长,方可用于检验。大豆酪蛋白培养基培养条件为30~35℃,营养琼脂培养基培养条件为37℃。暂时不用宜在2℃~8℃保存。
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