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实验方法

DNA提取方法

2015年09月07日 浏览量: 评论(0) 来源:生物帮 作者:生物帮 责任编辑:wlladmin
摘要:DNA提取方法
(1) 取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;
(2) 加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;
(3) 小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;
(4) 小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;
(5) 重复步骤(4)1-2次,以蛋白层不出现为止;
(6) 取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,离心10 min;
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(7) 弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次;
(8) 室温下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用。
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