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核酸蛋白检测仪的操作方法
2015年09月08日
来源：生物帮
作者：生物帮
责任编辑：wlladmin
摘要：核酸蛋白检测仪的操作方法
1.29.1 操作方法
打开电源，显示系统自检页面，如系统有错误则显示出错信息。
1.29.1.1 根据需要选择实验内容
(1) DNA/RNA
选择核酸类型：dsDNA, ssDNA 或RNA；接受或者修改换算因子。
DNA寡核苷酸或RNA寡核苷酸：输入摩尔消光系数和分子量。或者，选择系统自带方法计算摩尔消光系数和分子量。(附：
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只需输入序列、长度或组成，SmartSpec Plus会以g / ml和pmol / l为单位显示出样品浓度，并计算摩尔消光系数和分子量)。
选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长。
(2) 蛋白质
选择计算方法
Bradford：检测595 nm吸光度
Lowry：检测750 nm吸光度
BCA：检测562 nm吸光度
UV：检测260、280、320 nm吸光度
其它：用户指定吸收波长
选择制作标准曲线
新建一个标准曲线
使用原有标准曲线。
(3) 波长扫描
设置扫描上限、下限。(系统工作波长范围200-800 nm)
选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长
选择快速扫描或慢扫描
对于快速扫描，选择连续扫描次数
(4) 动力学分析
选择需要收集的波长
选择数据收集时间
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选择连续收集间隔
选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长
(5) 换算因子修改
接受或者修改换算因子
(6) λ
选择需要收集的波长数
指定收集的波长
选择是否扣除背景。如果是，选择指定背景波长
1.29.1.2 操作步骤
(1) 输入稀释倍数(系统默认稀释倍数为1.0)
(2) 调零。将空白对照放入样品仓，按Read Sample键读取数据。
(3) 收集样品吸光度。将样品放入样品仓，按Read Sample键读取数据。重复本步骤直到所有样品吸光度收集完毕。
(4) 样品吸光度及/或浓度能自动显示。按Abs键查看样品在别的波长的吸光度。DNA或RNA寡核苷酸浓度可用ug / ml和pmole / ul表示。按Conc键在这两个单位间切换。当处在吸光度和浓度界面是，可按ENTER键返回Ready界面，或者放入下一个样品直接按Read Sample键。
(5) 检测完上一个样品，按向左箭头退出检测界面。
(6) 蛋白质检测，保存标准曲线并打印所有报告。
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1.29.2 注意事项：
(1) 为了尽量减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A。在此范围内颗粒的干扰相对较小，结果稳定。样品的浓度不能过低或者过高。
(2) 混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值;
(3) 混合液中不能有气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈;
(4) 必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则测定浓度结果差异太大;
(5) 换算系数和样品浓度单位选择要一致;
(6) 不能采用窗口磨损的比色杯;
(7) 样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积(50ul);
(8) 通常浓度的样品可以用10 mm光程长度进行检测。对于高浓度的样品，只需将比色皿旋转90°，使用稍短的2 mm光径进行检测。
1.29.3 重要的比值表示样品的纯度：
(1) A 260 / A 280，用于评估样品的纯度。纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
(2) A230 表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、多肽、苯酚等，较纯净的核酸A260 / A230的比值大于2.0。
(3) A320 检测溶液的混浊度和其他干扰因子，纯样品A320一般
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是0。
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