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血液形态学观察
2015年09月10日
来源：原创
作者：李晓菲
责任编辑：admin
摘要：血液形态学观察
1血液涂片标本的制作
1.1 血液图片标本的制作（仪器法）
1.1.1 准备清洁的载玻片。
1.1.2 打开旋转涂片机电源开关，将清洁的载玻片平放于仪器的平台上。
1.1.3 将新鲜采集的全血100 ul滴在载玻片中央。
1.1.4 仪器调节1.75～2.5 S，脚踏式开关操控仪器自动离心，至指示灯熄灭，离心完成后取出涂好的血涂片。
1.1.5 进行Wright染色。
1.2 血液涂片标本的制作（手工法）
1.2.1 贮备清洁的载玻片。
1.2.2 准备吸引玻片（用计数板的盖玻片替代）。
1.2.3 用左手拇指（左撇子用右手）核中指或者食指水平地拿起载玻片，右手拇指和食指拿起吸引玻片。
1.2.4 使吸引玻片的一端或两端附着适量的血液。
1.2.5 血液沿载玻片和吸引玻片地接触面均匀扩散时，将吸引玻片按一定速度滑动。
1.2.6 涂抹部分停留在载玻片的1/2～2/3，不要过厚或过薄。
1.2.7 涂抹结束后将载玻片晃动、干燥，在室温下放置1 h以上使其干燥。
1.2.8 涂抹血液的载玻片用甲醇固定2～5 min。
1.2.9 然后，进行Wright或Giemsa染色。
2 Wright染色
细胞染色机制：染色是将细胞经染色剂的物理和化学作用，使其清楚显示细胞各个组成成分，有利辨识细胞形态。
2.1 将血涂片浸泡于Wright溶液（原液）染缸中，放置2 min。
2.2 用1/150 M磷酸缓冲液（pH 6.4）或蒸馏水将Wright染液稀释10倍，再将血涂片浸泡于10％ Wright溶液的染缸中，放置6～10 min。染色时间在室温较高时可缩短，室温较低时可延长。
2.3 最后用蒸馏水冲洗2～3遍后，干燥。
3 白细胞分类方法
3.1 为了测定白细胞的百分比，将涂片置于显微镜下，移动涂片，分别区分每个细胞，进行计数。
3.2 计算白细胞的百分比至少需要100个细胞。
4 光镜检查
4.1肉眼观察：涂片厚薄是否适宜，涂膜是否合格，
4.2低倍镜观察-观察涂片全貌：
4.2.1涂片染色是否合格，了解全片有核细胞及各系细胞分布状况；
4.2.2观察外周血白细胞数及各类白细胞分布及其比例
4.3 油镜观察：要求观察具有代表性区域的细胞形态比例，分类计数。
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