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实验中网织红细胞检查方法-显微镜目测法

2015年09月11日 浏览量: 评论(0) 来源: 作者:李晓菲 责任编辑:lascn
摘要:网织红细胞的检测方法有显微镜目测法、网织红细胞计数仪、流式细胞仪、多参数血细胞分析仪四种方法。

   网织红细胞的检测方法有显微镜目测法、网织红细胞计数仪、流式细胞仪、多参数血细胞分析仪四种方法。

  1. 显微镜目测法:人工计数1000~2000个红细胞,网织红细胞所占百分数。受主观因素影响较大,结果与染色部位、染色时间、燃料与血液的比例有关,准确性较差。

  2. 网织红细胞计数仪:网织红细胞计数仪是专门进行网织红细胞测定的仪器,可自动染色、自动分析、自动打印各阶段网织红细胞分布图,结果 准确,但仪器昂贵且单一难以广泛应用。

  3. 流式细胞仪:流式细胞仪将红细胞染色后将含有RNA的网织红细胞计数,但它不能分析其成熟程度。

  4. 多参数血细胞分析仪:为网织红细胞计数提供了先进的测量手段,这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理,不但能客观准确计数、测量网织红细胞,而且还能根据其RNA含量,估计网织红细胞的成熟程度,其最大的优势是对网织红细胞分群,客观地将网织红细胞分成高荧光强度网织红(HFR:属早期网织红),中荧光强度网织红(MFR:属中期网织红),低荧光强度网织红(LFR:属晚期网织红),同时还能提供网织红细胞中的血红蛋白含量(CH-r)等参数,这些指标对临床及科研颇有价值。

   受仪器局限性,下面重点介绍显微镜目测法。

   5 所需器材及耗材

   5.1 器材:显微镜、小试管(0.6×8.0 cm)、载玻片、推片、专用玻棒、计数器。

   5.2 耗材:0.4%新美兰溶液、镜油、二甲苯、擦镜纸、试管塞。

   6 染色

   6.1 往小试管中加2~3滴新美兰溶液。

   6.2 采待检动物静脉血2~3滴,立即加入试管中,摇匀、盖上试管塞。

   6.3 将试管静置15~20 min。

   7 涂片

   7.1 拿一张干净的载玻片,取一小滴血和美兰的混合液(约大米粒大)置于载玻片的一端。

   7.2 用一干净的推片一端放在血滴前方,逐渐后移接触血滴,血液可立即沿推片边缘散开。

   7.3 将推片与载玻片保持30~45°角,平稳的向前推动至载片的另一端,使载片上留下一层薄血膜。

   7.4 把制成的血涂片,在空气中挥动使其迅速干燥。

   8 计数

   8.1 将已制好的血涂片放于载物台上,开启显微镜电源,用低倍镜在血膜体尾交界处选择血细胞分布均匀、无重叠的地方作为计数区域。

   8.2 用一硬纸片中央开1约2×3 mm小孔,放于目镜中,以缩小视野。

   8.3 转换到油镜,在选好的区域内,挑选细胞染色效果清晰的视野开始计数。

   8.4 计数1000个红细胞中含有的网红细胞数,结果除以10,即得到网红细胞的百分数。

对不起,暂无资料。
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