斑马鱼类过敏反应评价模型
斑马鱼品系:野生型AB品系。
适用范围:化学药、生物药、纳米药物、天然混合提取物、中药提取物。
药物处理方式及周期:可根据药物特性采用水溶暴露,或者注射给药方式——卵黄囊注射或血液循环注射,将斑马鱼转入96孔板中,每个孔4尾斑马鱼,加入200 μl养鱼水或含药物的养鱼水,每个实验组设置8个复孔。加入药物的同时,加入类胰蛋白酶的底物BAPNA。使用酶标仪检测各组样品的OD405数值,定量评价药物是否诱发类过敏反应。
图14. 不同浓度底物对检测类胰蛋白酶水平的影响. C48/80,一种公认的可以诱发类过敏反应的物质;BNPNA,类胰蛋白酶的底物,被类胰蛋白酶水解后在405 nm处有最强的光吸收.( Rui Yang, et al, The Journal of Applied Toxicity, 2014).
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