实验方法
震惊条件放射实验方法
1、基本原理:震惊反射是哺乳动物对外界刺激自然产生的简单行为反应,也是评价动物反应性的一个敏感指标。它包括始于头部和尾巴的一些列快速运动:随着声音刺激的产生和增强,动物主要肌群出现收缩和舒张。抗焦虑的药物使这种反应减弱、幅度降低,致焦虑剂则相反。
2、PPI(前脉冲抑制):短暂而强烈(一般大于80dB)的听觉刺激可以引起震惊反射。在强的震惊反射刺激出现之前20~500ms内对实验动物施加一个本身不能引起震惊反射的声音刺激,可以将震惊的幅度减小80%。这种在强烈的震惊反射刺激出现前的一段时间内出现的若感觉刺激对震惊反射的抑制作用就叫做PPI。
3、PPI测试通常使用听觉刺激模式,通常采用爆破白噪音,常用刺激序列如下:每一轮刺激刚开始时让受试对象适应一定强度的背景噪音,且持续在整个实验过程中,首先给予仅有强刺激的小实验,然后给出弱刺激与强刺激为不同时间间隔的一系列小实验,小实验顺序以随机方式给出,每两个小实验之间的时间间隔为8~30s或更长(通常为15~20s),以便后面的刺激是作为新奇刺激出现的,避免了前面刺激产生的不应期对后面刺激的影响,而且随机变化的实验间隔时间较固定间隔更少出现惊跳反射的适应性。
4、为保证声音刺激和实验数据的准确性,设备应配备标准仪器,在每次实验前用标准仪器对设备进行校准。
范例一:
简介:用雄性的wistar大鼠,体重约200g,实验用一个特制的装置,包括:
(1) 数个敞开的笼子(8cm*8cm*16cm);
(2) 一个隔音箱,内有四个平台,并装有一排风扇,可给箱内提供50dB(SPL)的噪声。箱顶部离动物14cm高处有一个扬声器产生白噪声;
(3) 应变计(strain gauge);
(4) 电脑(装载Xeye 震惊条件反射系统分析处理软件);
实验流程:
1、将大鼠单个放入笼内,笼可限制大鼠运动,但不固定大鼠。然后将笼置于隔音箱平台,使大鼠安静地适应5min。
2、声音刺激由98dB和120dB(持续20ms)的突发噪声组成。每一声刺激产生的同时,测定200ms内大鼠的反应。
3、通过应变计测定大鼠在笼内的躯体运动,以电压变化表示,并经过数字模拟转换为重量(g)变化,计算机自动记录数据。刺激后200ms的最大重量变化为震惊峰值,同一刺激重复12次得出平均峰值。一个实验间期包括每个刺激强度随机重复12次,刺激间隔为20~40s(随机出现)。实验前测一次作为对照值,结果用给药后的测定值占给药前值的百分比表示。
范例二:Spontaneous Nicotine Withdrawal Potentiates the Effects of Stress in Rats
流程:分为两个独立的阶段(session)
1、大鼠置于震惊笼,在昏暗条件下安静地适应5min,
2、 然后大鼠实施30次震惊刺激,90、95和105dB分别10次(?),平均刺激间隔时间30s,伪随机顺序(pseudorandom),黑暗环境,为第一阶段震惊实验。
3、随后大鼠被从实验笼中取出再置于饲养笼中,也是暗环境安静适应5min或15min。
4、然后大鼠重新放入震惊笼中,准备第二阶段的实验
5、第二阶段的实验与第一阶段完全一致,除了一个是在暗环境下,一个是在明亮环境下。