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ripply1在斑马鱼早期胚胎背腹发育中的作用

2015年11月20日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报 2015年第5期 作者:孟亚平 刘春业 石德利 责任编辑:admin
摘要:利用斑马鱼整封原位杂交技术揭示ripply1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达模式,探究ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发生过程中的作用。

目的:探究ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发生过程中的作用。

方法:利用斑马鱼整封原位杂交技术揭示ripply1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达模式,通过显微注射技术在胚胎1细胞期注射ripply1的mRNA来高表达Ripply1蛋白并在后期观察胚胎背腹标记基因的变化及胚胎形态变化。利用Tol2转基因技术构建ripply1启动子驱动的GFP转基因鱼。

结果:原位杂交结果显示ripply1基因在斑马鱼原肠早期胚盾期特异表达在胚盾处,即预定的背部。高表达ripply1后,在胚盾期背部标记基因表达范围扩大,腹部标记基因表达减弱,受精后24小时胚胎表现出严重的背部化表型:头部增大,腹部卵黄延伸减弱,尾部躯干及尾部区域减少,有的甚至形成了第二个体轴。得到的转基因鱼揭示ripply1母源表达,并且转录起始位点上游1200个碱基驱动的GFP能模拟内源基因的表达图式。

结论:ripply1可能参与斑马鱼胚胎早期背腹轴的发生。

 

 

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