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I型鸭肝炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用
2016年01月14日
来源:中国比较医学杂志 2015年第12期
作者:刘海燕 赵丽丽 牛银杰 祝明皓 刘胜旺 陈洪岩
责任编辑:wlladmin
摘要:建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。
目的 :建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。
方法 :根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成一对引物和一条TaqMan探针,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。
结果 :该方法敏感性达20拷贝,比常规PCR敏感性高。其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和禽流感(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,I型鸭肝炎病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集100份样品,阳性率为92%。说明I型鸭肝炎病毒在江苏徐州地区的鸭群中普遍存在。
结论 :建立了I型鸭肝炎病毒荧光定量PCR方法。
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