RSS订阅

模型制备

呼吸道合胞病毒诱发的病毒性支气管哮喘模型

2016年01月20日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型》 作者:刘恩岐 李亮平 师长宏 责任编辑:wlladmin
摘要:呼吸道合胞病毒诱发的病毒性支气管哮喘模型

【造模机制】在卵清蛋白(ov-albumin,OVA)致敏的条件下,呼吸道合胞体病毒(respiratory syncytial virus,RSV)可明显增加小鼠气道辅助Ⅱ型 T淋巴细胞(Th2)的数量和气道反应性,并加重致敏相关的肺组织病理改变,而且RSV作为感染源致呼吸道病毒感染可直接破坏与气道紧密相连的上皮细胞,使气道上皮通透性增加、气道内的感觉神经末梢暴露,气道上皮的保护作用丧失,气道内炎性介质的释放增加,从而诱发气道高反应性和哮喘。

【造模方法】选用清洁级6~8周龄雌性 BALB/c小鼠,采用RSV结合OVA诱导致敏小鼠建立急性病毒性哮喘动物模型。第1天、第8天背部皮下、腹腔注射致敏液0.2ml(1.0g/L OVA 0.1ml和0.2g/L氢氧化铝凝胶0.1ml混合);第14~27天将小鼠置于透明密闭容器中以50g/L OVA溶液20ml雾化吸入激发,每次20分钟,1次/d;第28、31、34天用3g/L戊巴比妥0.3ml/只,腹腔注射麻醉小鼠后,用效价为1.0×10 6.5 TCID50/ml RSV 50μl;第29、30、32、33天继续以50g/L OVA溶液20ml雾化吸入激发,每次20分钟,1次/d。每日观察小鼠症状,于最后1次滴鼻24小时后测定相关指标。

【模型特点】雾化激发过程中,可以观察到小鼠出现不同程度的头面部瘙痒、前肢缩抬、呼吸急促、腹肌抽搐、安静少动等症状;滴鼻后,小鼠呼吸加快加深,并有明显喘鸣音。各组细胞总数、巨噬细胞(macrophages)、淋巴细胞(lymphocytes)、嗜酸性粒细胞(eosinophils)及中性粒细胞(neutrophils)均显著升高。H&E染色,OVA/RSV组可见肺泡壁明显增厚、充血、水肿及炎细胞浸润,气道壁明显增厚,气道黏膜皱襞增多,管腔狭窄,血管周围及支气管周围有炎细胞围管性浸润,主要是淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞,上皮细胞轻度变性。

【模型评估和应用】模型喘息症状明显,病理生理特征符合哮喘,且用具有活力的RSV感染诱发的哮喘与临床病毒性哮喘的实际发病情况相近,具有可比性,可为哮喘研究提供更好的选择工具。

点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息
Baidu
map