目的： 探讨低分子量肝素钠(low molecular weight heparin sodium,LMWH-Na)佐剂对甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。

方法： 将ICR小鼠随机分成8组,6只/组,分别为甲型肝炎减毒活疫苗HepA-l (18 EU)与5种不同剂量(100 μL,20 μL,10 μL,1 μL,0.1 μL)的低分子量肝素钠混合免疫小鼠作为实验组,并取生理盐水作为阴性对照组(Blank)、HepA-l (18 EU)作为阳性对照组、HepA-l混合 Al(OH)₃(300 μg)作为铝佐剂对照组,共免疫一次,于免疫后第 4、8、12、16周进行尾静脉采血,采用 ELISA 法检测小鼠血清中抗 HAV 抗原特异性 IgG 抗体水平。在试验期间,对小鼠的健康状况进行观察,并于免疫16周后,取低分子量肝素钠最大剂量组100 μL组及生理盐水组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏各主要器官制作病理切片进行对比观察。

结果： 除阴性对照组外,各组小鼠免疫后第4周后均产生抗-HAV IgG,并随时间的延长抗体水平逐渐升高,于第 8 周达到最高值,此后逐渐下降。同一时间不同组的抗体水平不同。其中,第4周,第8周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠100 μL组,低分子量肝素钠20 μL组,低分子量肝素钠10 μL组的抗体水平高于阳性对照组且差异具有统计学意义(P < 0.05),第12周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠20 μL组和低分子量肝素钠10 μL组的抗体水平高于阳性对照组(P < 0.05),第16周,铝佐剂对照组和低分子量肝素钠10 μL组的抗体水平高于阳性对照组(P < 0.05),但在整个实验期间,低分子量肝素钠各组的抗体水平都低于铝佐剂对照组的抗体水平。表明低分子量肝素钠可增强 HAV 抗原特异性体液免疫应答,具有佐剂效应, 最佳剂量为10 μL/组,但其佐剂效应低于铝佐剂效应。试验期间,各组小鼠均未出现异常。低分子量肝素钠100 μL组小鼠肾、脾、肝、肺、心组织均未观察到病变。

结论： 低分子量肝素钠可明显增强 HAV 抗原诱导小鼠的体液免疫应答,具有成为新型疫苗佐剂的研发价值。

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