人胃癌裸鼠原位接种模型
【造模机制】胃癌的生长、转移与复发是血管生成因子依赖性的,人胃癌裸鼠原位移植是将人胃癌组织或细胞种植于裸鼠,其影响因素较多并受到广泛的重视,如血管内皮细胞生长因子、一氧化氮、环氧化酶2等。
【造模方法】
1.取3~5周龄的裸小鼠,体重18~20g,采用硫喷妥钠全麻,开腹后在近前胃处的胃黏膜下接种人胃癌细胞SGC-7901悬液0.2ml(含癌细胞数约1000000)。
2.将手术切除的胃癌肿瘤组织剪碎至1立方毫米,种植在裸小鼠背部皮下。成瘤后皮下反复传代3~4次,待肿瘤在皮下稳定生长并且直径增大到1~2cm时。处死荷瘤裸鼠。无菌操作。解剖裸鼠,完整取出皮下肿瘤,将皮下肿块剪碎至1~2立方毫米。将待种植的裸鼠麻醉后,切开腹壁各层,暴露胃壁,在胃大弯侧小心切开浆膜层并将要植入肿瘤处的浆膜除去,将处理好的肿瘤组织块用吻合胶粘贴并固定。将胃放回腹腔,逐层关腹。
【模型特点】接种后3天可见接种部位苍白、僵硬;接种后1周,黏膜接种部位隆起处有结节并向周围浸润;接种后2周,胃部隆起肿块明显,胃部分黏膜皱襞消失,局部淋巴结肿大,腹腔内可见少量腹水;接种后3周,胃部肿块增大质硬,与周围结肠、脾等之间连成团块状,病变证明癌细胞在黏膜与肌层浸润生长并累及浆膜。
用免疫缺陷动物建立人胃癌裸鼠原位移植模型中,对试验动物的饲养条件、环境控制以及饮食和供水有严格的要求。此外,肿瘤组织块种植过程中对胃癌组织的处理也是影响模型成功的关键因素。
【模型的评估和应用】建立的人胃癌裸鼠胃原位接种模型,再现了临床胃癌的局部浸润淋巴结转移、腹腔内播散等病理过程,为胃癌研究提供了一种新的与人体更为接近的动物模型。建立人胃癌原位移植模型再现胃癌发生的机制,能有效地筛选抗肿瘤药物,研究各种因素在胃癌的发生发展中所起到的作用,研究移植瘤生长及其转移等方面有不可替代的作用。