胚胎干细胞是毒性预测的有用工具，2003年，欧洲替代方法验证中心(european centre for validation of alternative methods, ECVAM)发布了通过验证的胚胎干细胞试验方法(embryonic stem cell test, EST)，成为胚胎和发育毒性动物试验的三个替代方法之一。 经典的EST方法周期偏长、通量低，形态观察的检测终点量化程度低。10多年来，传统的EST方法已取得了重要进展，例如诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS)技术的革命性突破，解决了测试系统来源困难的问题；基于微孔培养技术与流式标志物分析的高通量测试提高了定量检测毒性终点的效率；“组”学技术和信号转导技术的运用优化了检测终点的特异性。 技术上的进步提高了EST方法的适用范围，为胚胎干细胞应用于毒性机制研究和预测研究提供了快速发展的机遇，同时也对这些优化方法的验证提出了挑战。

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