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推荐一种简单实用的细胞冻存方法
2016年02月24日
来源:生物帮
作者:生物帮
责任编辑:wlladmin
摘要:一种简单实用的细胞冻存方法
冻存液:一般用10%DMSO(推荐用sigema原装的,质量好不用预消毒)+10%血清的完全培养基,如果细胞珍贵的话最好用10%DMSO+90%全血清。
降温方法:用最少两厘米厚的医用棉纱将冻存管紧紧包裹,扎紧,直接放入-70度冰箱,隔夜取出冻存管直接放液氮冻存。
复苏效果对比:细胞冻存2周后复苏,本方法冻存的细胞与使用程序性降温仪冻存的细胞复苏效果相差不大,但明显比传统4度、-20度、-70度的方法要好,传统的冻存方法不但费时费力,而且各时间段的放置时间并无严格统一,尤其在4度和-20度时间不好掌握。
要点:面纱包裹一定要足够厚,细胞用冻存液重悬后不要在常温放置太长时间。从-70度取细胞的时间无严格控制,我们曾经放过一个星期后在入液氮,同样可以顺利复苏。
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