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腺病毒介导靶向NF-κB基因的shRNA对体外食蟹猴子宫内膜细胞增殖活性的影响

2016年04月13日 浏览量: 评论(0) 来源:南方医科大学学报 2015年第03期 作者:朱峰城 刘木彪 潘颖 王雪峰 陈燕英 责任编辑:admin
摘要:合成高特异性靶向NF-κB基因的shRNA腺病毒载体,观察其对体外培养的食蟹猴子宫内膜细胞的增殖活动是否具有直接的抑制效应。

目的:合成高特异性靶向NF-κB基因的shRNA腺病毒载体,观察其对体外培养的食蟹猴子宫内膜细胞的增殖活动是否具有直接的抑制效应。

方法:设计携带有NF-κB-p65基因及空载基因的shRNA腺病毒载体,体外培养食蟹猴子宫内膜细胞,分成实验组及对照组,实验组转染携带NF-κB-p65 shRNA的腺病毒,对照组转染携带空载基因的腺病毒,共培养后观察有关细胞增殖活性如凋亡蛋白及细胞周期的改变情况。

结果:腺病毒载体PCR和测序结果与预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为1.58×1011 U/ml。NF-κB-p65-shRNA腺病毒感染食蟹猴子宫内膜细胞后,实验组子宫内膜细胞凋亡蛋白的表达水平明显高于阴性对照组(P<0.05);实验组凋亡细胞较对照组明显增多,进入细胞分裂期细胞数明显少于对照组(P<0.05)。

结论:携带NF-κB基因的腺病毒体外感染食蟹猴子宫内膜细胞后可加速子宫内膜细胞的凋亡,并抑制子宫内膜细胞的增殖,为后期该基因在食蟹猴子宫内膜异位症模型上的研究提供理论基础。

 

全文阅读:腺病毒介导靶向NF-κB基因的shRNA对体外食蟹猴子宫内膜细胞增殖活性的影响

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