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模型制备

营养性脂肪肝模型

2016年02月29日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型》 作者:刘恩岐 李亮平 师长宏 责任编辑:wlladmin
摘要:营养性脂肪肝模型

【造模方法】胆碱蛋氨酸缺乏(methionine- choline-deficient,MCD)饮食常用来诱导经典的 NAFLD动物模型。MCD饮食富含碳水化合物(40%)和脂肪(10%),但缺乏参与肝细胞脂肪酸β氧化和合成极低密度脂蛋白的蛋氨酸和胆碱,用于喂养的啮齿类动物,如大鼠和小鼠。

高脂饮食(high fat diet,HFD)模型:使用HFD(碳水化合物、脂肪、蛋白质分别占总热量的52%、30%和18%)饲养大鼠、豚鼠、家兔、犬等均可诱发 NAFLD。

全胃肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)模型:成年大鼠深静脉(如上腔静脉)插管。连接输液泵将非蛋白营养液(如高葡萄糖加氨基酸的高营养液体或葡萄糖加脂肪乳)持续滴注。

Tsukamato-French大鼠模型:1984年,Tsukamato- French等给大鼠手术植入胃管,持续注入含乙醇的液体食料维持大鼠血中200~300mg/dl的乙醇浓度,造模3个月,或同时以热量固定,含少量玉米油(4.9%热量)液体食料持续胃管饲养30天。

乙醇灌胃模型:在喂养固体饲料的同时每日乙醇灌胃(11~12g/kg)大鼠4周,也可导致与 Tsukamato-French方法相似的肝组织学病变。用高度白酒(60°左右)每日灌胃一次(5ml/100g),给予营养缺乏饲料(面粉、次粉、草粉、豆粉,按2:1:1:1比例配方,另加少量豆油及食盐),于每晚禁食至次日上午空腹灌胃后再喂饲料,连续75天即可产生酒精性脂肪肝。灌胃亦可使用白酒、玉米油、吡唑混合液(白酒8~12g/kg,玉米2g/kg,吡唑24mg/kg),造模时间为12周。

【模型特点】

 MCD模型:简便易行,但发病及其程度与鼠的性别、品系、种类有关,饲养小鼠1~2周即有明显的肝脂肪变,2周后发生肝脏坏死性炎症继而出现窦周和中央静脉周围纤维化,伴血清转氨酶显著升高和肝脏内脂质氧化酶基因表达上调;饮食饲养 Sprague Dawley大鼠则进展慢,在造模2周出现肝脂肪变和氧化应激,5周时出现肝脏炎症坏死伴转氨酶轻度升高,12周出现肝纤维化。MCD饮食喂饲鼠肌肉和躯体脂肪含量减少伴体重下降,造模4周后外周组织对胰岛素敏感可出现低血糖。

 HFD模型:造模4周出现散在性肝脂肪变,8周呈现单纯性脂肪肝,12周为脂肪性肝炎,16周肝脏炎症坏死程度加剧伴窦周纤维化,24周脂肪变和炎症略减轻,但纤维化加剧,甚至出现间隔纤维化。大鼠腹部内脏脂肪增多,外周血游离脂肪酸和总胆固醇进行性升高,伴门静脉内毒素血症、肝细胞线粒体损伤、氧应激脂质过氧化损伤以及肝脏库普弗细胞激活等现象,并且有胰岛素抵抗,但体重和血液TG增加不明显,

TPN模型:当营养液中非蛋白能量占33%以上或总摄入量占总热量的83%以上时,1周后大鼠肝脏即有明显的脂肪变性。若使用高葡萄糖和氨基酸的高营养液体增加至所需非蛋白质能量的146%[相当于350非蛋白质卡,(kg·d)]和335%氮需要量[相当于2.7g氨基酸氮/(kg·d)],1/2天即出现肝大,2天后肝糖原、脂肪增多。至第4天肝脏脂肪增加4倍,伴随肝内必需脂肪酸缺乏逐渐加重。

乙醇灌胃模型:动物体重增长缓慢,饮食量明显下降,大部分动物会出现大便溏泄。病理组织学可见肝细胞水肿,呈气球样变,胞质内广泛出现大小不等的圆形脂肪滴,并可见嗜酸性规则或不规则小体形成,即乙醇性玻璃小体。汇管区炎症细胞浸润明显,并可见胶原纤维增生,肝窦内皮细胞肿胀。 

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