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慢病毒介导ACE2过表达对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肝细胞的白蛋白表达及迁移能力的影响
2016年03月25日
来源:南方医院大学学报 2015年第05期
作者:张莉莉 张文雍 李洋 李旭
责任编辑:admin
摘要:探讨血管紧张素转换酶2(Angiotensin-converting enzyme 2, ACE2)过表达对血管紧张素Ⅱ(Angiotensin II, AngⅡ)诱导的肝细胞白蛋白表达下调及细胞迁移性增强的抑制作用。
目的:探讨血管紧张素转换酶2(Angiotensin-converting enzyme 2, ACE2)过表达对血管紧张素Ⅱ(Angiotensin II, AngⅡ)诱导的肝细胞白蛋白表达下调及细胞迁移性增强的抑制作用。
方法:常规培养大鼠肝细胞系BRL-3A细胞株,予以Ang II(10-7 mol/L)进行刺激,观察不同处理时间(24、48 h)组肝细胞内白蛋白、波形蛋白(vimentin)表达及细胞迁移性的改变;通过构建lentiACE2慢病毒载体,建立稳定过表达ACE2的细胞系,并分别用AngⅡ、A779进行干预,观察肝细胞内相应蛋白表达及其迁移性的改变。采用细胞免疫荧光、Western blot检测细胞中蛋白水平变化;Transwell迁移实验观察不同处理组细胞迁移能力的改变。
结果:AngⅡ处理组肝细胞内vimentin表达显著增加、albumin表达减低,细胞迁移能力显著增强,并具有时间依赖效应。ACE2 过表达大鼠肝细胞albumin 表达明显升高,vimentin 蛋白表达下降,该作用被MAS受体抑制剂A779 阻断。同时ACE2过表达显著抑制AngⅡ的作用,vimentin合成显著下降,albumin表达水平显著升高,细胞迁移能力受到抑制。
结论:ACE2过表达可抑制AngⅡ诱导的肝细胞albumin表达下调及迁移能力增强。
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