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固定液的配制方法
2016年03月02日
来源:生物帮
作者:生物帮
责任编辑:wlladmin
摘要:固定液的配制方法
2.24.1 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)
50%或70%酒精90ml+冰醋酸5ml+福尔马林(37%~40%甲醛)5ml
可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。固定时间最多10h。如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml。
2.24.2 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)
福尔马林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml
固定一般的植物组织,通常固定24h,可长久保存。
2.24.3 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液)
配方Ⅰ:纯酒精3份 + 冰醋酸1份
配方Ⅱ:纯酒精6份 + 冰醋酸1份 + 氯仿3份
适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。固定时间不宜过久。
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2.24.4 酒精-福尔马林固定液
福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml
固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h,亦可长久保存。
2.24.5 酒精-福尔马林-甘油固定液
95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml
此液也可长期储存材料。
2.24.6 铬酸-醋酸固定液
根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:
(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml;
(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml;
(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml;
弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透,可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h。
强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透,可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h或更长。
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2.24.7 铬酸-醋酸-福尔马林混合液
这3种药品混合在一起所配成的各种固定液,通常称纳瓦兴固定液(Nawashin fixative),简称Craf。配方见下表:
甲、乙两液均为贮备液,使用之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水多的材料,可选用Ⅰ或Ⅱ固定,坚韧而成熟的材料,可用高浓度的Ⅳ或Ⅴ,一般材料多用Ⅲ。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时,常用桑弗利斯固定液。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ固定液的固定时间为12~48h,桑弗利斯液固定时间为4~6h。
2.24.8 铬酸-锇酸-醋酸固定液(Flemming fixative)
(1) 强液:10%铬酸水溶液3.1ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml + 蒸馏水 11.9ml;
(2) 中液:10%铬酸水溶液0.33ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml + 蒸馏水6.27ml;
(3) 弱液:10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml + 蒸馏水96.5ml 此固定液需现用现配。
固定23~48h。可用于各种植物组织的固定。
2.24.9 Lichent’s固定液
1%铬酸水溶液15ml + 冰醋酸5ml +福尔马林80ml 此固定液适用于固定丝状藻类和真菌。
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