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HE染色方法
2016年03月02日
来源：生物帮
作者：生物帮
责任编辑：wlladmin
摘要：HE染色过程包括五个内容：脱蜡,染色,脱水,透明和封固。
整个染色过程包括五个内容：脱蜡,染色,脱水,透明和封固。
2.26.1 脱蜡
(1) 从温箱中取出烤干的切片,立即投入二甲苯中脱蜡5～
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10min(可在二瓶中进行),脱蜡时间长短取决于蜡是不彻底溶解。气温低可延长时间,气温高可适当缩短时间或在温箱中加速脱蜡。
(2) 移入无水酒精(100%)(二瓶)中,约2min。
(3) 移入90%酒精中(二瓶),约2min。
(4) 移入80%酒精中(二瓶),约2min。
(5) 移入70%酒精中,约2min。
(6) 移入水中,洗去酒精,约2～3min。
(7) 移入蒸馏水中,约2min。
2.26.2 染色
(1) 移入苏木素中,浸染8～15min,一般以稍深染为宜。
(2) 移入水中,洗去苏木素和浮色,约1～2min。
(3) 移入分化液(1%盐酸酒精)中,分化几秒至30秒钟, 使切片褪色至淡兰红色即可。分化的作用,可使细胞浆兰色脱去,而细胞核更加清晰,鲜丽,分化不足时,胞浆带兰,胞核过染,分化过度时,胞核太淡,难以辩认,可再退回苏木素染液, 延长一定时间。
(4) 移入流水中,洗涤30～60min,使组织呈鲜兰色或天兰色(兰化)。
(5) 移入伊红液中,浸染2～5min,如着染缓慢 , 可在伊红液中加入冰醋酸 (100ml伊红液加1～2滴冰醋酸)以助染。
(6) 移入水中,洗去伊红浮液,并用纱布擦净玻片上的多余染料。
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2.26.3 脱水
(1) 吸去玻片上的水分后多入80%酒精中,(二瓶)脱水,约1～2min, 如在酒精中褪色很快时,可迅速移入90%酒精或返回伊红液中复染。
(2) 移入90%酒精中(二瓶)脱水,约2～4min。
(3) 移入无水酒精(100%酒精)(二瓶)彻底脱水,约4～8min。
2.26.4 透明
(1) 移入二甲苯Ⅰ中透明3～5min。
(2) 移入二甲苯Ⅱ中透明5～10min。
2.26.5 封固:
用树胶封固,先从二甲苯Ⅱ中取出切片,将组织外围的二甲苯迅速擦去,在滴上一滴树胶于组织片上,然后取干净的盖玻片,仔细加在封固剂上,慢慢压平, 使盖片位置适中。切片封固后,放在温箱中烤干,或平置凉干后装盒。
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