Thy1系膜增生性肾炎动物模型
Thy1系膜增生性肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)模型为大鼠胸腺细胞抗体诱发的系膜增生性肾炎模型,是目前广泛应用并公认比较典型的肾炎模型。
【造模机制】Thy1为大鼠胸腺细胞分化抗原, Thy1抗血清可直接与大鼠系膜细胞表面抗原结合、激活补体形成膜攻击复合体,导致细胞裂解,从而引起残存的系膜细胞增生。经其反复攻击后,系膜细胞增生能较长时间持续,最终成功诱发Thy1系膜增生性肾炎模型。
【造模方法】
1.实验过程 家兔抗大鼠胸腺细胞抗血清的制备:卡介苗预致敏新西兰大家兔,14天后见两侧胭窝淋巴结肿大,注射胸腺细胞(100000000000/L)与弗氏完全佐剂。3周后同样途径再次免疫。2周后经耳缘静脉第3次免疫。1周测效价,满意后颈动脉放血,收集血清,家兔抗血清经大鼠肝粉吸附,-20℃保存,使用前56℃水浴30分钟灭活补体。
模型制备:取大鼠(6~8周)尾静脉注射家兔抗血清(0.6ml/100g),分别于后1天、3天、5天、7天、2周、3周、4周和5周处死动物,取肾脏做相应检查。 2.指标检测 处死前隔日观察其尿量、饮水量、24小时尿蛋白定量,将肾脏病理切片进行H&E染色,光镜观察肾小球的病理变化,同时对细胞核增殖抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)进行免疫染色观察,并计数肾小球系膜有核细胞。
【模型特点】
1.连续4次注射家兔抗血清,4周即可成功地建立Thy1系膜增生性肾炎模型。
2.病变明显,系膜基质增多显著,病变肾小球体积增大,第1天系膜溶解,肾小球数明显减少,第3天细胞开始增生,第7天显著增加并可维持到第5周。
3.诱导28天、35天时,PCNA、α-SMA阳性细胞增多且病变持续时间较长。
【模型评估和应用】肾小球系膜细胞增生以及系膜基质增多是多种类型肾炎常见的病理变化,也是肾小球硬化的早期阶段特征。该模型肾炎病变明显,系膜细胞增生显著且持续存在,系膜细胞α-SMA持续阳性,表明系膜细胞一直处于活化增殖阶段,病变持续活动,更符合临床上所见到的人类系膜增生性肾炎。该模型利用弗氏完全佐剂增强免疫,缩短了造模时间,症状典型,是目前国内外公认的研究系膜增殖性肾炎发病机制和防治措施的理想模型。
- 没有相关内容!