【造模机制】大肠埃希菌由膀胱经不完全梗阻输尿管逆行感染，早期可致单侧急性肾盂肾炎病变，晚期可致慢性肾盂肾炎病变。病理可见患侧肾脏变性萎缩，机体细胞免疫功能紊乱，抑制性T细胞功能低下，免疫球蛋白IgA、IgM增加，免疫活性细胞浸润，导致肾脏免疫病理损伤，造成肾组织结构的溶解，最终肾脏完全萎缩。

【造模方法】

1．动物  选用雄性C57BL/6J小鼠(体重18～20g)。

2．模型制备  造模前制备菌液，大肠埃希菌采用O111B4标准菌株，肉汤培养基，并对大肠埃希菌进行鉴定。在接种动物前，将细菌接种于一只小鼠肾脏，24小时取患肾细菌，将该增毒后的细菌溶于无菌盐水中，用比浊法调菌液浓度为2×1000000～6×1000000/ml。立即接种模型动物。小鼠术前禁水24小时，常规消毒，下腹部正中切口1.0cm。暴露右侧输尿管，用缝合线将其拉向右侧，并固定于腹壁外；挤出膀胱内残尿，向膀胱内注入大肠埃希菌悬液约0.2ml，缝合腹部切口，24小时后拆去右侧腹壁外输尿管的固定线。单纯梗阻组：手术后膀胱内不注射菌液，以等量生理盐水代替。

3．样本采集和指标测定  术后6、12、24、48小时，3、5、7、15、30天，2、3、4、5个月处死；单纯梗阻组分别术后1、3、5天处死。

4．观察指标  ①肾脏重量：称量双肾重量，计算所占体重比。②细菌培养：尿及心脏血液定性培养。双肾按1g肾重量相当于1ml盐水体积计算，补加盐水至1ml，制成匀浆，系列稀释后定量培养，以每毫克肾组织所占的细菌数(个/mg)，表示肾脏菌量。③血清检测：用单向扩散法将羊抗鼠IgG制成琼脂扩散板，打孔向孔中加入血清，以扩散环直径表示血清IgG相对含量。④血清大肠埃希菌凝集效价测定：将大肠埃希菌O111B4溶于5％甲醛，用比浊法使其浓度为1000000000000/ml，将血清倍比稀释，玻片凝集，以凝集的最大稀释倍数表示血清抗大肠埃希菌凝集效价。⑤肾脏形态观察：取部分肾组织，立即固定于10％中性甲醛24小时以上，常规石蜡切片，H&E染色观察肾脏组织结构改变。动物处死后迅速分离肾脏，并立即冻于液氮中，冷冻切片，丙酮固定，检测IgG沉积及菌体抗原存在。

【模型特点】

1．此模型可观察从急性感染到慢性萎缩整个肾盂肾炎发展的全过程。尿细菌培养6小时起即出现阳性，一直持续到30天。患肾感染2天内肾盂黏膜即出现广泛性化脓灶，髓质可见不同程度中性粒细胞浸润；7天后病变面积更加广泛，出现化脓灶和坏死灶30天转为慢性炎症细胞弥漫性浸润；60天转为局灶性；90天后患肾极度萎缩，肾组织严重破坏。免疫组化染色观察30天菌体抗原IgG有沉积，至90天仍有IgG沉积。

2．该模型动物健康侧的肾脏未患病，便于从感染机会、变化程度、肾脏重量等方面形成良好的自身对照。健康肾可代偿，进行长期观察。健康肾始终未见IgG沉积，未受病变累及，说明本模型无自身免疫因素的参与。人类肾盂肾炎大多为大肠埃希菌逆行感染，且病变多为单侧或一轻一重，形成慢性肾盂肾炎，多有梗阻、反流等因素存在。故此模型代表性强。

3．由于小鼠能长期存活，能够动态观察，便于获得每个阶段的血清学、免疫学、细菌学、病理学等多学科材料，为慢性肾盂肾炎的基础研究及防治提供了良好的实验动物模型。

【模型评估和应用】肾盂肾炎是泌尿系统常见病、多发病，慢性肾盂肾炎由于病程长、反复发作，防治难度大，多预后不理想。单侧逆行性大肠埃希菌感染的慢性肾盂肾炎模型从致病菌、感染途径、病理和免疫改变等方面均与人类慢性肾盂肾炎相似，造模方法简单，重复性好，感染率高，病变显著且均一，是研究人类慢性肾盂肾炎病理变化及病变机制的理想动物模型。