(一)基本概念 

 除清洁级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原，这类动物称无特殊病原体(specific pathogen free，SPF)动物。SPF动物来源于无菌动物，必须饲养在屏障系统中，实行严格的微生物学控制。国际上公认SPF动物适用于所有科研实验，是目前国际标准级别的实验动物。各种疫苗生产所采用的动物应为SPF级动物。

(二)SPF实验动物饲育与管理的要求与意义

 在动物实验过程中，不同种属的动物对药物或毒物的反应不一，而同种属不同品系的动物对药物的反应差异也很大；另外，微生物的干扰及动物健康品质对实验结果的影响亦不容忽视。若动物健康状况不好，可使实验无法进行，特别是一些长期实验，如没有SPF的饲育条件，动物的寿命期就无法达到实验(如致癌试验)所要求的周期。由于SPF动物遗传背景明确，微生物状况清楚，故可避免上述情况的发生。SPF动物在许多领域均可应用，如生物医学研究(如药理学、病理学、肿瘤学、传染病学等)、疫苗制造、生物学鉴定、人体肿瘤异种移植、新药临床前的药理和毒理研究、致癌实验等。在致癌实验中，最常用的SPF级动物是裸小鼠。裸小鼠是小鼠的一种突变体，先天性无毛、无胸腺，为纯粹的B细胞动物，不起T细胞依赖免疫反应。由于裸小鼠具有先天性T细胞免疫缺陷，可作为异种或同种动物组织移植的受体，尤其是人体恶性肿瘤移植的受体，以研究致癌与免疫学的监视机制，恶性肿瘤的侵袭、转移机制，抗癌药物的筛选及体外培养细胞的致癌性研究。可以说，裸小鼠是大规模生产各种动物细胞的活的生化孵化器。

(三)SPF实验动物的饲育与管理

1．饲养环境的条件要求  饲养环境要求温度为18～29℃，日温差≤3℃，相对湿度达40％～70％，新鲜空气换气次数l0次／h，气流速度≤0.18m／s，压差25Pa，洁净度一万级，氨浓度l5mg/m³，噪音≤60dB，照度150～300Lux。

2．设施的管理  SPF动物饲养区及配套设施启用前，需经过多次的清洁、除尘、清洗、抹拭。然后用甲醛+高锰酸钾烟熏24～48 h后，开启送风排风系统24～48 h，将残留的刺激气味排净，工作人员换上高压消毒的净化防尘服到饲养区内，将烟熏用的用具清理好，用草酸液将溅出的高锰酸钾污迹抹去，搞好卫生。并通过省级动物监测部门的技术监测，获得设施合格证后方可使用。严格控制动物的质量，一定要在国家动物种子库引种，以保证动物的质量符合标准化要求。

3．人、物、动物的流向  人员流向：一更衣室→二更衣室→风淋→洁净走廊→饲养区→实验区→次洁净走廊→缓冲间→出屏障系统。具体操作：先用香皂洗刷双手至肘关节；在一更衣室内除去所有衣物、饰物，换上高压消毒的棉质衣、裤、口罩、帽子；在二更衣室内用75％乙醇泡刷双手至肘部约10分钟，再用消毒干毛巾擦干双手后，干棉球蘸上手术消毒剂涂抹双手至肘部，戴上医用手套，穿戴防静电无尘服(帽、衣、裤、套袜)，用酒精湿毛巾包裹门锁开门；风淋约20秒，从洁净走廊进入饲养区、试验区。开始操作时戴上纱手套(换笼及给动物喂食时要更换纱手套)，操作完毕以次洁净走廊进入缓冲间，出屏障系统。

物品流向：双扉高压消毒器(传递窗、渡槽)→洁净储物间→洁净走廊→缓冲间→出屏障系统→洗消间。具体操作：高压消毒的笼具、饮用水、饲料、垫料(不能高压消毒的物品如动物、鸡蛋、维生素类等，可经传递窗或渡槽，用紫外线、消毒剂杀菌)经另一侧门搬出到洁净储物间，用干净的小推车将消毒物品推至洁净走廊，送到饲养区、实验区。用过的垫料、水瓶、笼具等，用次洁净小推车送到次洁净走廊，经缓冲问出屏障系统，进洗消间清洗。

动物流向：外购→检疫室→繁殖区→洁净走廊→实验区→次洁净走廊→缓冲间→出屏障系统。具体操作：动物断奶后(28日或l月龄)，工作人员做好详细的繁殖记录，注明出生日期，经洁净走廊送人实验区。在实验前，弄清动物的品系、性别、鼠龄、体重等，还要明确实验手段和要求。结束实验的动物经次洁净走廊人缓冲间，出屏障系统。而在外购买的动物，则应在检疫室观察7～14日，无异常才能经洁净走廊到实验区。

4．日常管理

(1)垫料：每个鼠笼内的垫料，高压消毒后才可使用，每周换笼2次，废垫料要及时处理，防止污染环境。

(2)酸化水：从过滤器中流接洁净水，加入盐酸，将pH调至2.8～3.0，临用前加入维生素C、复合维生素B，每周更换2次，注意检查瓶塞，防止漏水溺毙动物。

(3)饲料：应无菌、高营养，每次投放3～4日的饲料，添加熟鸡蛋和灭菌葵花籽。    

(4)采光：l2小时明，l2小时暗。

(5)繁殖：雄：雌比例为1：2～3，随机同笼，未怀孕雌鼠每2周换雄鼠l次，2个月未孕或母性差的要淘汰。

(6)裸鼠仔鼠的汰留：由于纯合子鼠表现为无毛及缺乏正常胸腺，而杂合子的各方面表现均正常。因此，在繁育过程中，纯合子(nu／nu)可供实验和留种用，杂合子(nu／+)雌鼠用作留种。为保证其他仔鼠能健康成长，一般在出生后l周内淘汰(nu／+)雄鼠，因为(nu／nu)仔鼠生活能力低，而(nu／+)鼠特能抢奶吃而应尽早淘汰。

(7)挂卡记录：每只动物均应挂卡(繁殖卡、实验卡)，详细记录动物的种属、品系、代号(名字)、出生日期、留种日期、交配日期和配偶代号、生产日期、生产仔数、存活状况、断奶日期。实验动物挂实验记录卡，记录动物的种属、品系、性别、实验性质、组别和编号、实验手段和结果(用药剂量、肿块大小等)。全部记录卡要作为一种原始资料加以妥善的整理和保管、存档。   

(8)笼具的清洗和要求：先用竹铲刮松笼具内的垫料，倒干净；用清水浸泡后用刷子刷洗，再用洗洁精稀释液将笼具里外洗遍；最后用清水充分冲洗，避免残留的洗涤剂刺激动物皮肤；叠放晾干，待高压消毒。同样步骤洗去笼罩污垢，晾干待消毒。每次用完的水瓶、吸管、刀具等，清洗干净(水瓶要用瓶刷刷洗，不能有沉淀物或长青苔)，消毒后再用。

5．管理人员全体管理人员应为医学、动物学等相关专业人员，并经严格的专生培训．能全面熟练地掌握各方面的无菌操作和各种仪器设施的使用，保管方法及动物的饲育管理技术。对动物要有爱心，不得戏弄或虐待动物。进入屏障系统操作时，管理人员要严格控制污染，认真执行无菌操作，工作完毕后，用酒精湿毛巾拭抹动物室四壁及地面,出入线路绝对不得逆行；出入屏障系统应开紫外灯做空气消毒1小时。使用高压消毒器的人员要经过专业培训并达合格，要求能熟练掌握高压消毒器的操作步骤(表压力为0.1lMPa，温度为121℃，恒温恒压30min)，并严格执行安全操作规程。消毒全过程要专人看管，谨防意外事故发生。管理人员要经常检查各种仪器设施的运转情况。机房新风口的初效过滤膜要看灰尘过滤情况，有的每周更换清洗l次，屏障系统每季做微生物标准化监测1次。在SPF级动物的饲育管理中，严格控制饲育、管理、操作中的微生物状况，可使环境因素更标准化，饲育的动物具有更长的寿命期，从而提高我们的科研质量和水平。