RSS订阅

模型制备

病毒诱发性T淋巴细胞白血病动物模型

2016年04月13日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型》 作者:刘恩岐 李亮平 师长宏 责任编辑:wlladmin
摘要:病毒诱发性T淋巴细胞白血病动物模型

【造模机制】某些白血病,特别是病毒诱发的白血病,利用组织培养方法有可能建成悬浮式生长的细胞株,因此,采用津638病毒诱发昆明小鼠白血病组织的含细胞提取液,皮下注射给新生615小鼠,经81天潜伏期,取1只患白血病的615小鼠,用生理盐水制备25%的脾细胞悬液,皮下注射给4只成年615小鼠,诱发白血病发生,平均存活时间为29.7天,以患病小鼠的脾脏为瘤源,在615小鼠连续移植传代,能百分之百发病,且存活时间逐渐缩短,达30代后建成稳定的白血病模型,称L615白血病动物模型。

【造模方法】将L615白血病细胞进行体外传代后,确定活细胞数占总细胞数的96%以上,按1×1000000个细胞经腹腔注射入正常L615小鼠。接种后第3天起,每日断尾取血进行外周血白细胞计数及血涂片后行瑞氏染色和过氧化物酶染色后找白血病细胞,证实种鼠发病后,模型建立成功。第7天小鼠濒死前用颈椎脱位法处死后,将小鼠浸于75%乙醇中10分钟,在无菌条件下取脾脏,分离干净脾脏包膜后,预冷PBS液清洗2次,在100目金属网中边研磨边滴加RPMI 1640液,直至研磨完全后收集细胞悬液,以1500r/min离心5分钟,弃去上清液后,用自配预冷红细胞裂解液处理10分钟后,再次用200目尼龙网过滤,RPMI 1640培养液重悬并计数,按1×100000个细胞的接种量接种于实验的 L615小鼠腹腔内即可获得T淋巴细胞白血病动物模型。

【模型特点】L615白血病小鼠存活时间为(6.7±1.2)天,除皮下接种外,腹腔接种亦可百分之百发病,存活时间稍短,但无腹水形成。L615小鼠白血病对各类抗肿瘤药物有不同程度的敏感性。

【模型来源】中国医学科学院天津血液病研究所。

【模型评估和应用】L615T淋巴细胞白血病小鼠,是我国自己建立的T淋巴细胞白血病小鼠动物模型。它是人类T细胞白血病发病机制、药物筛选及药效、预后等研究的很好的动物模型。在此基础上建立了我国特有的小鼠白血病模型系统,如 L7212、L7710、L7711、L759、L7811等均为T淋巴系统白血病。

相关文章
  • 没有相关内容!
点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息
Baidu
map