独立送风笼具的使用管理
(一)IVC操作使用前的准备工作
(1)启动超净工作台风机,净化台内环境,打开工作照度灯。
(2)检查超净工作台中已准备的各种灭菌饲养用品和实验物品(饲料、垫料、水及实验用品)是否齐全。若需更换笼盒,检查灭菌笼盒准备情况,并用不锈钢推车移至超净工作台移门边。
(3)检查喷雾器喷洒效果及超净台内外擦抹用的药液是否配置好。
(4)打开房间内排风系统,排除打开笼盒时逸出的有味气体。
(5)检查IVC机组各仪表或读数,目视各笼盒内的动物情况,估测IVC运行情况。
(6)记录主要环境参数,如温度、相对湿度、笼盒内外压差等。
(二)IVC操作使用程序及操作规范
(1)工作人员带好一次性口罩、帽子及医用乳胶手套。戴手套前应洗净手及指甲,若指甲太长应适当修剪,以免戳破医用乳胶手套。
(2)用双手轻轻抬起IVC笼盒外端,沿笼架搁挡向外移出笼盒,放在超净工作台的不锈钢推车上。
(3)用药液喷雾器充分喷洒双手手套外表及IVC笼盒的外面,消毒灭菌并粘住表面的尘埃,防止进入超净台时被层流气体吹扬。也可用戴手套的双手浸入药液容器中,捞起并拧干药液毛巾,擦干手套外液滴,同时擦拭笼盒的外表。
(4)打开超净工作台移门(高度满足笼盒进入),把笼盒移入超净工作台。
(5)适当拉下超净工作台移门(高度满足操作者两手活动自如),打开IVC笼盒盖,侧放在一边。
(6)目视笼盒中动物的生活情况,做出添料、加水、换盒及动物实验的选择。
1)添加饲料 啮齿类动物为自由采食(因实验需要,限量供给除外),添加时,加满料斗即可,也可根据动物的数量,一次加料维持3d左右。
2)饮用水一般一瓶250mL的水可维持4~8只小鼠3d。断水的主要原因是饮水口漏水,防止断水的关键是选择优质水瓶和灌水后拧紧瓶盖。打开笼盒,取出水瓶,更换1瓶清洗过水瓶并经灭菌的饮用水。也可用经过灭菌的空瓶,在超净台中直接通过龙头灌装超滤酸化水,装毕,关龙头阀门,防止泄漏,以免腐蚀超净工作台台面。
3)更换笼盒 由于笼盒内换气次数高,带走了盒内水分,保持了盒内垫料干燥及空气清爽,笼盒一般可延长到1~2周更换1次。必要时,更换笼盒,铺放适量灭菌垫料,添加饲料及饮用水,盖上盒盖,扣紧笼盒搭扣,送回IVC笼架,对准笼架进出风口沿笼架搁挡,轻轻推入,接口后在笼架固定钮内放下即可。最后把原笼盒上的动物卡片移插至新的笼盒上,并把换下的笼盒集中外运处理。更换笼盒时,也可顺便检查一下盒盖上的终端过滤器情况,并进行适当处理(互相对换、换膜等)。
4)动物实验 按上述方法,打开笼盒盖,在超净工作台内再次对带有乳胶手套的双手用75%浓度的乙醇棉球擦拭消毒。从笼盒中取出动物,放在小动物手术台上,固定、麻醉、手术、止血、缝合,或灌药、注射、采血,或处死、解剖、取标本等。实验完毕,顺便检查一下动物饲料、饮水及笼盒的污染情况,做出加水、加饲料、加垫料或换窝的选择。
(三)操作注意事项
(1)操作之前,工作人员须使用75%的乙醇进行手消毒。
(2)使用0.5%过氧乙酸或75%乙醇对超净台“工作面”进行消毒,或紫外灯照射30min后启动“超净台”电机。
(3)动物饲育盒必须在超净台内方可打开,更换水瓶、加饲料、动物观察、动物给药等都必须在超净台内进行;操作过程应该是无菌操作,防止微生物污染。
(4)超净台使用完毕,使用消毒药进行消毒,停机。
(5)每次工作完毕,对设施进行清洁卫生,同时对设施内空气进行喷雾消毒。
(6)本系统所用的饲料、垫料、饮用水、饲育盒都必须经过灭菌处理。为了延长使用期,饲育盒可用0.5%过氧乙酸浸泡式喷雾灭菌。
(7)遇设备故障或停电等突发事故,必须尽快打开动物饲育盒上“生命口”上的盖子,以防动物窒息死亡。设备恢复正常后,重新盖好“盖子”。
(8)通过送风机箱上的“送风量”调节钮来调整送风量,一般情况下,维持空气压力在15~25Pa。当空气压力不能维持在100Pa时,请更换或清洗高效过滤网。