检测藻类16SrDNA特异性片段在溺死诊断中的应用
2016年05月25日
来源:南方医科大学学报 2015年第08期
作者:李鹏 徐曲毅 陈玲 刘超 赵建 王玉仲 余政梁 胡孙林 王慧君
责任编辑:admin
摘要:建立藻类16SrDNA特异性片段扩增方法,探讨其在溺死诊断中的应用价值。
目的:建立藻类16SrDNA特异性片段扩增方法,探讨其在溺死诊断中的应用价值。
方法:35只实验兔随机分组:生前入水组(溺死组)15只,死后入水组(空气栓塞致死后入水)15只,对照组(空气栓塞死后不作处理)5只;微波消解-真空抽滤-电镜扫描法检测过的20例水中尸体肝脏样本20份(硅藻阳性14份,阴性6份)。7种已知藻(直链藻、菱形藻、针杆藻、舟形藻,铜绿微囊藻,小环藻,小球藻)作为对照。提取组织样本及藻类DNA,扩增产物银染显带。
结果:生前入水组肺、肝、肾检出率分别为100%,86%,86%;死后入水组肺、肝、肾检出率分别为13%,0%,0%。对照组肺、肝、肾藻类未检出。生前入水组与死后入水组各种脏器中藻类检出率差异显著(P<0.05)。20份经微波消解-真空抽滤-电镜扫描法检测的水中尸体肝脏样本中,使用本方法15份样本结果为阳性(包括1份硅藻阴性样本)。7种藻类DNA扩增结果为阳性。
结论:本文所建立的PCR法检测藻类16SrDNA灵敏度高,可对多种溺死藻类同时检测,有较好的应用前景。
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