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巴马猪NK细胞表型鉴定及猪CIK细胞诱导方法建立
2016年07月08日
来源:中国实验动物学报 2016年第3期
作者:祝明皓 陆涛峰 牛银杰 赵丽丽 陈洪岩
责任编辑:admin
摘要:获得巴马猪外周血淋巴细胞中NK细胞的表型及比例的数据,建立一种高效率猪CIK(cytokine-induced killer)细胞体外诱导培养的方法。
目的: 获得巴马猪外周血淋巴细胞中NK细胞的表型及比例的数据,建立一种高效率猪CIK(cytokine-induced killer)细胞体外诱导培养的方法。
方法:分离巴马小型猪外周血淋巴细胞,通过检测CD2+/CD8+/CD3-细胞以表征猪NK细胞的表型;通过优化诱导培养条件,提高诱导淋巴细胞中CIK的比例,建立高效率CIK细胞体外诱导方法。
结果:利用优化的诱导培养条件,在诱导培养第5天时CD3-/CD2+/CD8+的NK细胞的比例可高达43.63%,较最初分离时NK细胞比例提升了5.59倍;细胞增殖活性实验表明诱导培养第5天时可见明显的3个荧光峰,表明诱导后细胞发生了3次分裂,理论上较最初分离增加了8倍;诱导细胞的qPCR表型分析表明该细胞群体在诱导培养第5天时相关的表面标志有明显的上升也与流式分析结果一致。
结论:建立了高效的猪CIK细胞体外诱导培养的方法。
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