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Pin1在皮肤组织中的表达以及可诱导转基因小鼠模型的建立
2016年09月02日
来源:中国实验动物学报 2016年第04期
作者:向建 陈鹏 张莉 卢坤平 廖新化
责任编辑:admin
摘要:Pin1通过调控底物蛋白质进而调控多种细胞功能,包括细胞周期和细胞增殖、胁迫应答、神经功能以及免疫反应等。
目的: 观察Pin1在皮肤中的表达情况,构建Pin1在皮肤中可诱导表达的转基因小鼠模型。
方法: 将小鼠Pin1基因克隆到改造过的可与Myc标签蛋白融合的pTRE2载体中,并将线性化的DNA通过显微注射的方式构建TRE-Pin1小鼠。
结果: 成功获得TRE-Pin1转基因首建鼠,该小鼠与上皮特异的K14-rtTA转基因小鼠配繁,获得Pin1在皮肤上皮特异性可诱导表达的双转基因鼠;通过将多西霉素(又名强力霉素,Doxycycline)加入饮水的方式诱导Pin1基因的表达,并通过Western blot,免疫组织化学等方式证明了Pin1蛋白在皮肤上皮中能特异性地过表达。我们还发现内源的Pin1在皮肤中主要表达于上皮细胞。
结论: 成功构建了Pin1在皮肤中可诱导表达的转基因小鼠模型,为后续研究Pin1在皮肤中的功能奠定基础。
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