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上皮钠离子通道对大鼠破骨细胞分化和骨吸收功能的影响
2016年09月20日
来源:南方医科大学学报 2016年第8期
作者:虎松艳 金小冬 张豪 陈珺 杨国柱 王晓东 唐璐 陆幸妍 卢丽 李青南
责任编辑:admin
摘要:本实验拟通过研究Ami对破骨细胞功能的影响,探讨ENaC与破骨细胞功能及骨质疏松的关系,为治疗骨代谢疾病的作用机制研究提供新思路。
目的:本文探讨上皮钠离子通道(ENaC)对破骨细胞功能和活性的影响。
方法:采用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录 因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞。以1.5×104密度接种到12孔板,查随机表分3孔为1 组,分为4组:Control组和不同浓度阿米洛利(Ami, ENaC的抑制剂)组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞 鉴定;将破骨细胞和骨片共同培养,测定骨吸收陷窝的数目;用RT-PCR技术分析破骨细胞标志酶基因组织蛋白酶K(CK)的表 达。
结果:不同浓度的Ami处理破骨细胞后,TRAP染色阳性破骨细胞减少,抑制破骨细胞的形成和骨吸收,而且降低破骨细胞 特异性基因CK的表达。
结论:本次实验在细胞水平证明ENaC在破骨细胞上的表达并且调控破骨细胞的分化和骨吸收,说明 ENaC可能参与破骨细胞的功能调节,提示破骨细胞可能存在一个与ENaC相关调节的新途径,为骨代谢的研究提供了一个新思路。
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