目的：利用吗啉代寡核苷酸技术建立下调斑马鱼lmna基因的技术方法。

方法：在斑马鱼lmna基因序列中选择靶点，设计针对斑马鱼lmna基因的吗啉代寡核苷酸序列（lmna-MO），构建能特异指示lmna基因表达的lmna-EGFP-pCS²⁺重组质粒，并通过显微注射方式将二者共注射入斑马鱼胚胎中，通过观察胚胎中绿色荧光表达量反应lmna基因表达量，并通过蛋白质印迹法检测胚胎中lamin蛋白表达量。

结果：蛋白质印迹法检测斑马鱼体内lamin蛋白的表达，分别有大小为69 KD和62 KD两种蛋白表达。设计并构建了lmna-MO和重组质粒lmna-EGFP-pCS²⁺，单独注射lmna-EGFP-pCS²⁺质粒后观察到从6 hpf到96 hpf胚胎均有绿色荧光蛋白表达；二者共注射后观察到，与对照组相比，实验组从6 hpf至30 hpf胚胎中绿色荧光蛋白表达量均不同程度下降或消失；蛋白质印迹实验结果显示实验组胚胎内lamin蛋白表达量明显下降。表明已成功下调了斑马鱼胚胎lmna基因表达。

结论：可通过lmna-MO和重组质粒lmna-EGFP-pCS²⁺共注射方法下调斑马鱼lmna基因表达，并通过绿色荧光蛋白表达量反映下调效果。该方法可为深入研究人核纤层病提供良好的动物模型。

全文阅读：利用吗啉代寡核苷酸技术下调早期斑马鱼胚胎lmna基因的初步研究