实验方法
小型猪Ⅱ度根分叉缺损模型
通过外科手术建立小型猪Ⅱ度根分叉缺损模型。
1.实验方法 13月龄中国实验用小型猪4头,雄性,体重28.5~31.5k。小型猪常规麻醉后固定于动物手术台,消毒、铺巾后,以手术牙为中心,前后延伸1个牙位,在上下颌第二前磨牙颊侧牙龈乳头近中和第一磨牙颊侧牙龈乳头远中做垂直切口,用牙龈分离器翻开龈瓣,充分显露手术牙颊侧的牙槽骨。用骨凿去除实验牙颊侧牙槽骨暴露根分叉区,在牙合龈向及颊舌向再分别去除根分叉区内的牙槽5mm,制备成Ⅱ度根分叉区牙槽骨缺损模型,做根面平整,体积分数3%双氧水及生理盐水冲洗,后颊侧牙龈复位,用盐水棉球在颊侧轻压,使黏骨膜瓣与骨面紧密贴合,用4号缝线间断缝合龈瓣。建模成功的标准是在根分叉区内有骨缺损但尚未相通,用牙周探针可从水平方向不同深度地进入分叉区内。建模后1周拆线,饲养8周。建模成功后,以每头小型猪上下颌两侧第三、第四前磨牙为实验牙,将4头小型猪共16颗实验牙随机分为2组,模型组:仅建立Ⅱ度根分叉缺损模型,不做任何干预处理;对照组:从造模后开始,在人工根分叉缺损处注入2.2mg辛伐他汀凝胶,每周注射1次,50微升/次,注射后轻压组织瓣,使其与骨面紧密贴合。各组动物于观察8周后处死。大体观察后,以各实验牙为中心对硬组织制备牙及牙周组织块,以体积分数10%甲醛溶液固定,以备组织形态学观察。
2.实验结果 手术8周后,动物健康状况良好。实验牙位均未见明显的软垢。牙龈无充血肿胀,无探诊出血,牙齿无明显松动。对照组动物实验牙未见明显的软垢,个别牙龈稍充血肿胀,无探诊出血,牙齿无明显松动。建模后8周,去除所有实验动物软组织和黏骨膜暴露颌骨,可见模型组根分叉区空虚,基本无新生骨组织长入,可见大量血管以及纤维结缔组织;对照组新生骨基本长满缺损区域,与周围骨组织无明显分界。两组动物实验前缺损高度相比无明显差异,模型组新生牙槽骨高度低于对照组(P<0.05)。病理检查可见:对照组实验牙的新生牙槽骨几乎充满根分叉区,可见骨小梁成网状结构及成熟的哈弗系统,而模型组未见明显新生骨。细胞计数结果显示,对照组可见较成熟的纤维组织以及增生的血管。其成骨细胞数量多于模型组(P<0.05)、骨细胞数量也多于模型组(P<0.05)。