(一)血液采集

1．耳静脉采血

(1)操作程序(图3-7，图3-8)

1)剪毛：用动物剪毛推子或剪刀清除耳朵表面被毛(不同品种的小型猪耳朵表面被毛疏密、长短不同)。

2)扩张血管：可用纱布反复擦拭耳朵表面皮肤，或采用热敷、灯烤等方法使血管充盈，以便采血。

3)消毒：用75％酒精由内向外消毒采血部位，使用碘酒、碘伏等消毒液时应使用酒精脱碘，以便能够清晰暴露血管。

4)采血：待消毒液(采血部位)完全干燥后再进行采血，以免酒精等消毒液对相关检测造成干扰(例如，酒精对血糖值存在显著影响)。

5)止血：采血后用灭菌棉球或纱布等压迫采血部位2～5分钟，并确定止血效果。

图3-7  五指山小型猪耳背侧轻微隆起的耳静脉

图3-8  小型猪耳静脉快速血糖检测

(2)注意事项

1)需要微量血液时(如1滴至数滴)，用无菌注射器针头直接刺破末梢血管，选择不同粗细针头可有不同出血量。

2)需要血量较大时，先对耳朵进行加热处理以扩张血管是必要的，选较粗血管，逆血流方向进针效果较好。

2．前肢掌背侧静脉采血

(1)操作程序(图3-9)

1)剪毛：用动物剪毛推或剪刀清除前肢膝关节下方外侧10cm范围的被毛。

2)消毒：用消毒酒精由内向外消毒采血部位，使用碘酒、碘伏等消毒液时应使用酒精脱碘，以便能够清晰暴露采血部位。

图3-9  前肢掌背侧静脉采血

A．前肢掌背侧静脉解剖位置；B．小型猪  吊床保定，前肢掌背侧静脉采血

3)扎止血带：在采血部位上端(近心端)扎紧止血带，使采血部位血管充盈。

4)采血：在膝关节正中部位下3～5cm处进针，用拇指按压有时可以感觉到血管存在。掌背侧静脉向下至蹄背时分叉且表浅，皮下脂肪薄时，隐约可见，用于采血较方便。

5)止血：采血后用灭菌棉球或纱布等压迫采血部位2～5分钟，并确定止血效果。

(2)注意事项

1)前肢掌背侧静脉位置较深，体表无法触及，进针时要有一定深度。

2)掌背侧静脉向下至蹄背时分叉且表浅可见，便于采血，但小猪或乳猪因静脉细小且血液不够充盈往往不能满足采血需求。

3．后肢外侧隐静脉采血

(1)操作程序(图3-10)

1)剪毛：用动物剪毛推或剪刀清除后肢膝关节下方外侧10cm范围(外侧隐静脉前支或外侧隐静脉后支)的被毛。

2)消毒：用消毒酒精由内向外消毒采血部位，使用碘酒、碘伏等消毒液时应使用酒精脱碘，以便能够清晰暴露采血部位。

3)扎止血带：在采血部位上端(近心端)扎紧止血带，使采血部位血管充盈。

图3-10  后肢外侧隐静脉采血

A．后肢外侧隐静脉示意图；B．后肢外侧隐静脉采血

4)采血：后肢外侧隐静脉前支或后肢外侧隐静脉后支血管充盈后用拇指按压可触及，小猪或皮下脂肪薄时，血管隐约可见。

5)止血：采血后用灭菌棉球或纱布等压迫采血部位2～5分钟，并确定止血效果。

(2)注意事项

1)如在动物清醒状态下采血，应尽量固定小型猪的四肢。使用有软管连接的头皮针(静脉输液针、蝶形针)可防止动物挣扎时针头脱落或刺穿血管。

2)采血针头直径选择0.8mm以上为宜，若针头太细，会导致采血速度慢并凝血。

3)遇血管充盈度不够时(冬季或清晨，动物没有充分活动时采血部位肢体触摸感觉往往很凉)，应该对采血肢体及采血部位先行预热，否则难以满足采血需求。

4)后肢外侧隐静脉后肢血管位置相对固定且表浅，扎止血带后(特别是在经过预热处理后)血管充盈很好，常常用于成年猪清醒状态下采血。小猪或乳猪因静脉细小往往不能满足采血需求。

4．前腔静脉采血

(1)操作程序(图3-11)

1)麻醉保定：将猪常规麻醉后或人力保定仰卧在地面或实验台上，由助手将前肢分开并固定。

图3-11  前腔静脉采血

A. 前腔静脉示意图；B. 前腔静脉采血

2)确定采血位置：胸骨前端左或右侧，与第一肋骨、气管围成的三角区(前腔窝)为穿刺位置。

3)消毒：用75％酒精或碘酒、碘伏等消毒液，由内向外消毒采血部位。

4)采血：在前腔窝处垂直进针约4～5cm(进针深度随动物大小而不同)，进入前腔静脉血液会自动涌出。

5)止血：以灭菌纱布用力抵住采血部位。

(2)注意事项

1)若人力保定，需确保猪固定不动，否则可能因动物挣扎而穿透血管难以止血。

2)保定动物采取仰卧位，两前肢弯向尾侧，便于确定采血位置。

3)前腔静脉位置较深，采血针头应足够长。

4)为避开膈神经，采血部位通常选择动物右侧。

5)因为向心方向进针有时会扎到心房，所以采取垂直进针的方法较为安全，如果一次穿刺无血液流出，应拔出针头重新进针。

6)前腔静脉采血一般只用于小猪或乳猪(小猪或乳猪其他途径采血往往难以满足需求)，也可以应用于解剖取材前的大量采血，一般不用于实验期间的采血，因为操作不当时可能造成动物死亡或局部血肿、心包积液等后遗症。

5．颈内静脉留置导管采血  对于需要反复采血检查的实验，也可以采用静脉留置导管采血，但是，由于小型猪血管深，静脉留置管手术往往造成动物较大伤害，并不常用。因在气管的两侧均有颈内静脉，下面以左侧为例。

(1)操作程序

1)麻醉保定：将猪常规麻醉后右侧位固定在手术台上。

2)剪毛：在颈部左侧胸骨上窝至甲状软骨间15cm×15cm范围剪毛。

3)消毒：使用碘酒、碘伏等消毒液对手术区域进行消毒。

4)在左侧的颈侧面胸骨上窝至甲状软骨间，正中向气管方向纵向切开皮肤5cm，逐层分离，颈总动脉和颈内静脉伴行，利用钝性剥离技术将颈内静脉分离3cm。

5)结扎颈内静脉远心端并在颈内静脉近心端预留好结扎线，用眼科剪在颈内静脉上剪一小口，向心方向插入静脉留置管，插入深度约10cm，用预留的结扎线结扎好颈内静脉连同静脉留置管，为防止静脉留置管脱落，应结扎2～3道。

6)打隧道：猪右侧卧位，从颈内静脉留置管处向颈背部打洞，穿入静脉留置管；或消毒头颈部、背部的皮肤及导管，在动物的颈部及背部依次切开数个皮肤切口，用血管钳在皮下戳开一个皮下隧道，将导管埋于皮下。导管的末端接口引至背部。然后缝合切口及固定导管接口。

7)固定颈背部的外露采血接口，将预先准备的保护口袋缝在猪颈背部，将导管接口用肝素帽封好，放入保护口袋，锁上拉链。

8)术后伤口消毒。

9)采血。

(2)注意事项

1)导管脱落、导管感染、导管堵塞等问题较为常见。

2)对于导管脱落问题，除了采取多线固定导管口以外，还需在猪背部缝保护口袋，用来保护导管口。

3)为防止感染，每天清洗消毒皮肤缝合处，导管末端的注射帽在应用之前应该以异丙醇进行清洁，以减少细菌进入导管的风险。

4)为防止导管堵塞，采血后先用盐水冲洗导管，再用肝素盐水(2U／ml)冲洗导管并封闭，不采血时应每天冲洗并重新封闭。

(二)尿液采集

1．应用代谢笼收集尿液

(1)操作程序

1)清理猪笼舍，将残留粪便、尿液彻底清除干净。

2)插入托盘(洁净的粪、尿接盘)。

3)添加饲料和饮水。

4)24小时后或据实验时间安排抽出托盘，采集粪、尿样本。

(2)注意事项

1)使用前清理猪笼舍和托盘。

2)代谢笼应用期间，料斗内饲料或饮水不可加满，以免被猪拱出散落进托盘内。

3)使用自动饮水嘴的笼具，饮水嘴下必须设排水托架，并调节饮水压力不得喷溅。

4)及时清理笼具格栅地板上的粪便，发现散落在尿液中的粪便，要立即分离。

2．小型猪导尿技术  雄性小型猪尿道有三道锐角弯曲，无法采用常规导管导尿，获取尿液标本需采取膀胱穿刺或切开术；而对雌性小型猪可在麻醉状态下进行导管导尿。

(1)操作程序

1)常规麻醉。

2)用1％新洁尔灭或洗必泰棉球消毒阴唇、前庭和尿道口。

3)戴手套，铺无菌孔巾。

4)导尿时需两人配合，一人先用艾力斯钳牵开外阴边缘，另一人左手持喉镜，通过会阴照射前庭，充分显露外尿道口。注意上方为尿道外口，下方为阴道口。

5)右手用血管钳夹持导尿管前端2cm处，沾无菌液状石蜡后轻轻插入尿道，插入深度约5～8cm，见尿液流出，再插入1cm。

6)为确认导尿管在膀胱内，可用20ml注射器抽取适量生理盐水注入膀胱并回抽尿液，见尿液流出并抽推通畅后，将导尿管缝合固定在前庭，完成留置导尿术。

(2)注意事项

雌性小型猪的尿道口深，寻找尿道口是导尿的难点，因为雌性小型猪的阴瓣为一环形褶，尿生殖前庭腹侧壁的黏膜形成两对纵褶，消毒时需用艾力斯钳分别牵开前庭两侧壁，充分暴露尿道口。

3．膀胱穿刺采集尿液

(1)操作程序

1)常规麻醉。

2)将猪仰卧于解剖台(架)上。

3)在耻骨联合上方10～20cm范围备皮并消毒。

4)正中线垂直进针并轻轻回抽。

5)有尿液抽出即膀胱穿刺成功。

(2)注意事项

1)不同体重、不同年龄的猪皮下脂肪厚度有差异，应据此选择针头长度和进针深度。

2)当膀胱高度充盈时，从外部挤压就会有尿液从尿道流出。