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谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

2016年11月15日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志 2016年第10期 作者:王炳杰 胡延伟 赵叶芳 张仕东 责任编辑:admin
摘要:HUMSCs免疫原性极低,一般情况下不会引起免疫反应或者是移植物抗宿主病,因此受到临床工作者的青睐,有望成为理想的取材细胞。 本研联合应用Gln和HUMSCs,观察其对IR的影响。

目的:探讨谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞(MSCs)移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中作用。

方法体外复苏并培养脐血间充质干细胞移植前备用,观察CM-DiI荧光标记后脐血间充质干细胞的去向。80只SD大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注损伤组,谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组每组各15只。对照组采用生理盐水灌肠,损伤组采用TNB(S乙醇稀释)灌肠,在TNBS建模后1 h,谷氨酰胺组于尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg、MSCs移植组于尾静脉输入1×1010/L脐血间充质干细胞悬液,联合组尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg+脐血间充质干细胞悬液1×1010/L。通过ELISA法检测各组大鼠血清中肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、白介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;各组于再灌注1 h、3 h后检测肠组织含水率;通过RT-PCR、Western blot观察大鼠肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB、Bcl-2在谷氨酰胺联合MSCs移植后的mRNA和蛋白的表达情况。

结果通过荧光示踪法观察到移植的MSCs细胞分布于肠粘膜淋巴组织内和腺上皮细胞间,表明MSCs可能参与了肠缺血再灌注损伤的修复过程。各组大鼠血清中SOD、IFABP、IL-6的含量变化比较,损伤组血清中IFABP、IL-6的含量较对照组显著增加,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组与之比较,则显著减少,联合组减少更为明显,损伤组血清中SOD的含量较对照组显著减少,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组与之比较,则显著增高,联合组增高更为明显(P<0.05)。再灌注1 h和3 h,损伤组肠组织含水率均明显高于对照组;与损伤组相比,谷氨酰胺组、MSCs移植组及联合组肠组织含水率值均显著降低,联合组降低更为明显,而谷氨酰胺组、MSCs移植组差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,损伤组肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05),而谷氨酰胺组、MSCs移植组及联合组与之比较,caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显下调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05),谷氨酰胺组及MSCs移植组之间无统计学差异(P>0.05),但两组与联合组比较,差异明显(P<0.05)。

结论谷氨酰胺组及MSCs移植后,明显减轻了大鼠肠缺血再灌注损伤程度,其可能通过抑制caspase-3、NF-kB表达和促进Bcl-2表达减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。

 

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