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组织块法分离培养小鼠脾脏间充质干细胞

2016年11月17日来源：中国比较医学杂志 2016年第10期作者：丁丽朱恒张海宏杨洋韩冬梅王志东郑晓丽董磊闫洪敏刘静朱玲薛梅郭子宽王恒湘责任编辑：admin

摘要：我们在参阅大量文献的基础上，探索了胶原酶消化联合组织块培养法，以期建立出稳定、重复性好、细胞纯度高的小鼠脾脏MSC分离策略，从而为开展脾脏相关的造血和免疫学相关研究奠定基础。

目的：通过组织块培养法，建立一种高效可靠的小鼠脾脏间充质干细胞分离扩增策略。

方法：无菌条件下取小鼠脾脏组织充分碾碎，使用胶原酶消化获得的脾脏基质组织，将消化后的组织块种于培养瓶中，观察从组织块中迁移出的细胞形态，采用流式细胞术分析其表型，并将其做成骨和成脂肪诱导分化。

结果：消化后的脾脏组织块中迁移迁移出大量梭形纤维样细胞，流式细胞术检测结果表明，该种细胞高表达CD29、CD44、Sca-1和CD105，低表达CD11b、CD34、CD45和Ia。多向分化实验结果表明：小鼠脾脏基质组织中迁移出的细胞具有较好的成脂肪和成骨分化能力。

结论：组织块法可以分离培养出小鼠脾脏间充质干细胞，所获得的细胞纯度高，分化能力强，为开展相关研究提供了良好的细胞模型。

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