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模型制备

结扎冠状动脉左前降支所致的急性心肌梗死模型

2017年01月03日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin
摘要:结扎冠状动脉左前降支所致的急性心肌梗死模型

(1)复制方法  所用的动物为大鼠、犬和兔,在这里具体介绍用犬制造急性心肌梗死模型的方法,其他动物的造模方法与犬基本一致。将犬用3%戊巴比妥钠按30mg/kg体重的剂量静脉注射麻醉,同时经口插入麻醉用气管导管,接人工呼吸机,以30次/min频率,呼吸时比1.5:1进行人工呼吸,调节潮气量至呼吸正压为0.98kPa(10cm H2O)。将动物右侧卧固定于手术台上,于右侧腹股沟处分离股静脉,插入导管作输液用。上腹部正中切口,小心找出十二指肠,距幽门部3cm处作荷包缝合并插管,连接三通以备给药用。于左侧胸壁第3、第4肋间开胸,用扩张器张开胸腔,距膈神经2cm处沿神经走向剪开心包,然后将心包缝合于胸壁,充分暴露心脏;在冠状动脉左前降支第2至第3分支间游离冠状动脉,其下穿线2根,将按文献所制的30点心外膜电极四角用心血管无损伤连线缝合针缝合于心脏表面,电极间距8mm,同步描记正常肢体导联Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和加压肢体导联 aVR、aVL、aVF,然后描记表面30点心电图,描记肢体导联时心电图定标8mm/mv,心外膜电图定标为1mm/mv,记录纸速25mm/s。术后30min开始结扎。采用Harris两步结扎法:首次结扎前2min,从股静脉iv利多卡因5mg/kg,在结扎时加入一6号注射针,结扎后拔去;在首次结扎后30min,行第2次结扎。第2次结扎后连续观察心外膜心电图变化,测出各点心电图ST段位移总和(∑一ST)值和ST段位移≥2mv的心电导联数(N—ST)。3h左右处死动物,迅速取出心脏,切去心房及右心室,放入冰箱速冻1h,在冠脉结扎线下平行于冠状沟将心室等厚切成5片,放入0.1%硝基四氮唑蓝(N—BT)溶液中,于37℃恒温水浴振摇染色10min。正常心肌染为暗蓝色,梗塞区心肌不着色为浅红色,描记,扫描,利用Osiris软件计算出梗塞区面积占左室面积的百分比。冠脉结扎前及给药后3h各采右心室血3ml,3000r/min离心15min,取血清速冻。并在实验进行当中测乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)。

(2)模型特点  开胸结扎冠状动脉左前降支所致的急性心肌梗死模型,手术难度大,动物易发生室性心律失常导致室颤,需进行监护和除颤,必要时需于结扎冠脉前给予利多卡因预防严重性心律失常的发生。创伤大,定位准确模型的成功率和稳定性好,动物成本较高。

(3)比较医学  临床研究表明,几乎所有心肌梗死特别是老年患者,都主要是冠状动脉粥样硬化所致,偶尔为冠状动脉栓塞、炎症、先天性畸形引起。85%~95%急性心肌梗死尸检病例,在冠状动脉内均能发现闭塞性血栓。在冠状动脉粥样硬化的基础上,一旦粥样斑块内或其下发生出血或血管持续痉挛、发生血栓形成,使冠状动脉完全闭塞,导致心肌梗死。而开胸结扎冠脉左前降支所致的急性心肌梗死模型和临床的发病机制存在一定的差距,且开胸手术本身也引起动物出现一系列病理生理变化,但其心肌病理和心电图改变与临床相似。

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