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模型制备

兔电刺激心脏引起室性心律失常

2017年01月11日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  体重2.5kg左右新西兰兔,用3%戊巴比妥钠按30mg/kg体重的剂量静脉注射麻醉,侧位固定;将针状电极刺入兔四肢皮下接心电图机和心电示波器,做肢导联的Ⅱ导联心电图;正中切开颈部皮肤,分离气管插入气管套管,连接呼吸机进行人工呼吸,呼吸频率50次/min,潮气量35ml;然后从左侧第4、第5肋间开胸,沿膈神经侧约0.5cm处剪开心包,做心包床,用2只小型不锈钢蛙心夹改制的电极分别夹在心尖(正极)和靠近左心室房室沟处的心外膜上(负极),两电极之间距离约为1cm,连于电子刺激器,用串脉冲刺激,频率50Hz,波宽0.3ms,串长10s,恒压输出,每隔3min刺激一次。逐次增加刺激强度,每次增幅为2V,至到ECG上出现室颤(VF)波形为止。室颤后间隔5min-再重复测定1次,将两次致室颤的电压平均值作为给药前的室颤阈值(VFT)。如室颤后5s不能自行恢复,可用手直接按摩或以去颤器于心脏上直接去颤。然后静脉注射受试药物,为1ml/kg体重,阴性对照组注射同体积生理盐水,1min注完,隔3min后再进行刺激,以同样方法测得给药后室颤阈值,求出室颤阈值的增加值。

本模型也可将兔麻醉后仰卧位固定,从胸骨正中切口,剪开心包,小心不要弄破胸膜,可不用呼吸机行人工呼吸进行实验。电刺激目前也常用恒流刺激作为阈值指标。刺激器与心脏连接最好通过刺激隔离器。

模型制作也可用犬进行。用3%戊巴比妥钠按30mg/kg体重的剂量将犬麻醉后,气管插管连接呼吸机,行正压人工呼吸,左侧位固定,左侧第3、第4肋间开胸,暴露心包,沿迷走神经侧剪开心包缝合于胸壁。将不锈钢刺激电极置于左室前壁,无关电极置于房室沟处,也有置于大腿皮下。隔一定时间进行串刺激,频率50Hz,波宽0.3~3ms,串长0.2~2s,根据刺激器不同以恒压或恒流调准刺激强度,逐次增加刺激强度直至出现室颤,以这时的刺激器输出强度(电压或电流)作为室颤阈值(VFT)。也有以程控刺激方法测定 VFT,先以时程400ms、波宽3ms的连续恒定方波作为基础刺激起搏心脏,每18个基础刺激后100ms给以持续0.2~1.8s、频率50Hz的串刺激,逐次增加刺激强度直到出现室颤。如室颤持续时间较长,可用去颤器除颤。试验也可用猫进行,方法同兔和犬。用犬也可同时进行抗房性折返激动和抗心室颤动的双重研究,折返激动的模型:沿上下静脉和平行于房室沟的组织之间,以外科Y形挤压造成,然后用串刺激测定室颤阈。

(2)模型特点  兔和猫产生室颤后可自行复律,而犬的室颤较难自行恢复需电除颤。实验可比较精确的定量,固定电刺激的参数,同一动物反复刺激引起室颤的阈值是很稳定的,给予抗心律失常药物后观察同一动物上室颤阈值的改变,进行自身比较,精度较高。而且各种类型的抗心律失常药物在本模型上多数都有效,不易产生耐药现象,是最常用的研究抗心律失常的模型。

(3)比较医学  电刺激心脏诱发心律失常是一非常传统的模型。只要控制适度的刺激强度,对心肌没有明显的损伤作用,比其他方法更接近临床自然的异位冲动。

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