(一)材料与方法

1．实验动物

6～7周龄的雄性C57BL/6小鼠30只，体重16～18g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(沪)2003-0003。

2．瘤源

H22肝癌腹水瘤株，冻存于课题组实验室－80℃冰箱。

3．主要仪器

同前。

4．造模方法

同前。取腹腔传代第7日的H22腹水型昆明种小鼠，无菌抽取淡黄色腹水，显微镜下细胞计数，无菌生理盐水调整细胞密度为2×10000000/ml，充分混匀，常规消毒后于每只C57BL/6小鼠右腋皮下注射0.2ml，含细胞数为4×1000000个。

5．指标检测

四诊指标检测同前。第0日(接种肿瘤细胞前1日)、接种肿瘤细胞后第7日、11日、14日、20日各检测1次，共5次。

6．数据处理

方法同前。剔除数据：将接种后第14日肿瘤最大直径小于1.0cm的小鼠剔除，不用于数据分析。

7．统计分析

采用SPSS12.0统计软件，运用方差分析和t检验，P＜0.05表示在统计上具有显著性差异。

(二)实验结果

1．正常与HZ2肝癌荷瘤C57BL/6小鼠的外观

正常小鼠活跃、皮毛光泽；随荷瘤小鼠肿瘤日益增大，活动能力下降。与上述昆明种小鼠比较，H22肝癌腹水细胞在近交系C57BL/6小鼠皮下肿瘤生长相对缓慢，且瘤体偏小(图4-1-30～图4-1-34)。

2．成瘤情况

20只接种H22肝癌腹水的C57BL/6小鼠，有4只肿瘤形成不显著，肿瘤形成率为80％，成瘤不显著者，数据分析过程中给予剔除。

3．存活情况

接种后7日，两组小鼠腋下均能触及大小不等的肿瘤块。自第10日起，两组小鼠均出现自然死亡现象，至21日已死亡过半。不同时间荷瘤小鼠存活情况见表4-1-1。

4．去瘤体重与瘤体积

H22肝癌荷瘤小鼠估算去瘤体重如图4-1-35，经与正常组比较无显著性差异。瘤体积增长趋势如图4-1-36所示，H22肝癌细胞在C57小鼠上增长相对缓慢，至接种第20日时，瘤体积估算约1cm3，提示C57小鼠对H22肝癌细胞不如昆明种小鼠敏感。

5．瘤体大体解剖照片(接种后第21日)

当小鼠处死后(部分小鼠自然死亡)，解剖发现荷瘤小鼠肿瘤体积与估算结果近似(图4-1-37)。

6．腋温和抓力

小鼠腋温在不同时期检测有所波动，正常小鼠腋温多数在37℃～38℃之间，而荷瘤小鼠腋温总体偏低，与正常小鼠比较，荷瘤小鼠腋温在接种后第0日、11日、14日均有显著性差异(P＜0.05)，邪毒伤阳(图4-1-38)。

正常小鼠四肢抓力随体重增加，抓力呈现增加趋势；而荷瘤小鼠抓力下降，与正常小鼠比较，荷瘤小鼠在接种后第7日、11日有显著性差异(P＜0.05)，邪毒伤气(图4-1-39)。

7．旷场检测

荷瘤小鼠旷场检测，与正常小鼠比较无显著差异；前肢离地次数亦仅在接种第11日显著减少(P＜0.05)。这可能与该品系小鼠好动，且肿瘤体积增长迟缓有关(图4-1-40、图4-1-41)。

8．爪r值和尾r值

与正常组比较，爪r值仅在接种第20日下降显著(P＜0.05)，邪毒伤及精血(图4-1-42)；尾r值仅在接种第11日下降显著(P＜0.05)(图4-1-43)。

9．同病异证

进一步对编号6和编号11的H22肝癌荷瘤C57小鼠各证候的演变进行分析(图4-1-44、图4-1-45)。其中，No.6的小鼠全程未出现气虚证，相反气盛伴随始终；而No.11的小鼠于接种第7日后就表现为气虚证，其他如阳虚、阴虚程度改变均不显著。提示：不同个体荷瘤小鼠存在同病异证。