(1)复制方法  按Harary等建立的方法培养心肌细胞，即取出生后2～4d的Wistar(或Sprague-Dawleg)大鼠乳鼠，剪取心室，用胰蛋白酶分离心肌细胞，以含15％新生小牛血清的199(或Eagle)培养基制备细胞悬液，接种于玻璃培养瓶中，每瓶细胞数为3×1000000个，置培养瓶于二氧化碳培养箱中，37℃，95％空气+5％CO2，一定湿度条件下培养。每2～3d更换培养基一次，取培养3～8d的单层细胞进行实验。心肌细胞缺氧缺糖损伤：无糖Hank'S液或不含葡萄糖的Eagle培养基用高纯氮气饱和30min，使培养基氧分压低于30mmHg(4.0kPa)。单层心肌细胞换用缺氧缺糖培养基后，培养瓶内立即充入氮气(1L/min流量)30s。以驱除瓶内氧气，然后塞紧瓶塞密闭培养。缺氧不同的时间后可造成心肌细胞不同程度的损害。心肌细胞缺氧再给氧损伤：按上诉方法造成心肌细胞缺氧，缺氧3h后换用正常含糖的Eagle培养基或Hanks液(96％空气+5％CO2)培养1h，造成再给氧损伤。

(2)模型特点  这种方法造成心肌细胞缺氧，以及缺氧细胞生成的代谢产物在培养基中累积增高，而不是缺血，故与整体动物心肌组织缺血时的环境及代谢有所差异。

(3)比较医学  心肌细胞培养能排除神经体液，冠脉血管差异等因素的影响，所有细胞能处于均一环境中，故实验可靠，可观察药物对心肌细胞的直接作用。结合一定的实验条件还可以观察药物对心肌细胞收缩功能以及缺氧损伤的保护作用。