高脂饲料加空气干燥术致兔颈动脉粥样硬化模型
(1)复制方法 体重为2.0~2.5kg雄性实验兔,饲喂含1.5%胆固醇的颗粒饲料,1周后实施颈动脉内膜空气干燥术:动物术前12h禁食,不禁水,在严格无菌条件下,按30mg/kg体重的剂量静脉注射3%戊巴比妥钠麻醉,颈部常规消毒并去毛后,作颈正中切皮,于甲状软骨上方水平分离右侧颈总动脉,长约2.5cm,两端以动脉夹阻断血流。4.5号头皮针尽可能平行于血管纵轴方向穿刺阻断血管的两端,生理盐水冲洗置换出管腔内的血液后,接上已调节好流量为250ml/min的气流,历时5min造成内皮干燥,然后管腔内重新充满生理盐水,放开临时动脉夹恢复血流。湿润棉片轻轻压迫穿刺点3~5min止血。缝合皮肤创口并包扎,术前术后均无需使用抗生素。动物于手术后4周放血处死,取两侧颈动脉1和2cm,生理盐水冲洗后分别用10%甲醛和2.5%戊二醛固定,作光镜及透射电镜观察,弹性纤维染色及内膜/中膜面积比值分析,采血做血脂测定。术后1周肉眼见明显的管壁僵硬、增厚,2周及4周上述改变加重并在内膜可见白色条纹状隆起。光镜下术后3d见内皮细胞完全脱落,内弹性板层暴露于血管内腔;术后1周可见管腔内皮开始再生,多为一层内皮细胞;术后2周内膜下层可见大量梭形增生的平滑肌细胞,中膜肌层内胞浆嗜酸性的平滑肌细胞减少,代之以大量的胞浆淡染和充满脂质空泡的泡沫细胞;术后4周内膜继续明显增厚,细胞胞浆嗜酸性更不明显,代之以更典型的泡沫细胞。内膜中细胞间基质增多,泡沫细胞比例也较2周时增多,在内膜增生的部分细胞团中还可见新生滋养血管的形成。弹性纤维染色可见术后2周始内膜有明显增厚。TC和LDL-C明显升高。内膜明显增厚。
(2)模型特点 此模型通过造成内皮细胞功能障碍和变性而脱落,1~2周后开始两端修复再生,从而在较短的时间内诱发兔颈As;内膜增殖程度和内膜、中膜中细胞的增殖程度易于量化,可重复性好;操作简便,无需球囊导管等特殊器械;易于确定损伤病变部位,方便取材。有较典型的As病理改变,易于评价,适于干预治疗的动物模型。
(3)比较医学 颈动脉粥样硬化是造成脑血管疾病的主要原因,单纯长期高脂饲料可诱发脑基底As,但不易在颈动脉部位形成As病变。球囊扩张法造成血管内皮细胞即刻剥脱,并造成较严重的弹性板及中膜损伤,广泛应用于冠心病,因它的缺点,如内膜剥脱不完整、中层延展性损伤的存在和程度的不同以及一定的血栓形成率等不适于颈As病变的研究。此模型以高脂饲料加空气干燥术建立兔的颈As模型,在造模过程中损伤较轻,只损伤内皮细胞而不造成内弹性板和中膜的破坏,其内皮细胞的修复与内膜的增殖过程更接近于人类颈动脉疾病的生理过程。